流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的:
流式細胞儀能檢測多少個通道
需要同時檢測檢測多少個指標
廠家的抗體有多少種熒光標記
如果流式細胞儀的通道越多,那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多
A、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體
1) BD流式細胞儀
BD流式試劑選擇及應用的相關問答與簡介
流式細胞儀能檢測多少個通道是由有多少根激光決定的以及每根激光的功能決定的,所以首先需要注意兩點:
流式細胞儀有哪些激光。比如標配的FACSCalibur只有一根488nm的激光,能做FL1、FL2、FL3三個熒光通道/三個顏色,而選配的Calibur (FACSCalibur的簡稱)配有488nm和635nm兩根激光,可以檢測FL1-FL4四個通道/4個顏色。
不同型號的流式細胞儀的同樣的一個通道檢測熒光素的能力是不一樣的,比如Calibur的FL3(第3通道)能檢測PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCPCy5.5,PE-Cy7,而Aria的第3通道只能檢測PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP。 Calibur第3通道能檢測的PerCP-Cy5.5在FACSAria上是第4通道檢測。Calibur和LSR都能檢測4個顏色,但是第4個通道檢測熒光素是不一樣的