T淋巴細胞亞群與機體的免疫功能相關,當免疫功能紊亂時,T淋巴細胞亞群在相對百分含量及絕對計數的數值檢測上會出現異常。因此,T淋巴細胞亞群的檢測對監控疾病的發生發展、了解疾病的機制、指導臨床治療都有及其重要的意義。以往文獻以報道成年人淋巴細胞亞群計數研究較多,相關兒童的淋巴細胞亞群計數研究報道較少。本文采用流式細胞術方法,建立健康兒童T淋巴細胞亞群的百分含量及絕對計數分析正常參考值,希冀對臨床診療有所幫助,現報告如下。
1、資料與方法
1.1 一般資料 本組50例健康兒童外周血標本均來自我院體檢者,男28例,女22例,年齡7個月~18周歲。
1.2 試劑 CD4FITC/CD8PE/CD3PeCy5、CD45APC及溶血素購自美國Coulter-Immunotech公司,TruCount 管購自美國BD公司。
1.3 儀器 FACS Vantage流式細胞儀(美國BD公司)。
1.4 方法
1.4.1 樣品制備 50μl全血反相抽吸入TruCount管,加20μl熒光抗體,室溫避光孵育20min;50μl溶血素及500μl蒸餾水分別與標本孵育各10min,待檢。
1.4.2 流式分析 FACS Vantage流式細胞儀,配置氬離子激光器及氦-氖激光器,激發波長分別為488nm和633nm。采用CellQuestPro軟件分析T淋巴細胞群體百分含量及細胞絕對計數,收集測定細胞10000個。
1.4.3 統計學方法 采用均數±標準差(x±s),方差分析。
2、結果
健康兒童T淋巴細胞(CD3+細胞群體)占淋巴群體的百分率為65.16±7.05%,絕對計數為2029.75±718.85個/μl全血,輔助性T淋巴細胞(CD3+、CD4+細胞群體)占淋巴群體的百分率為38.61±6.15%,絕對計數為1226.00±482.44個/μl全血,抑制性T淋巴細胞(CD3+、CD8+細胞群體)占淋巴群體的百分率為23.38±7.31%,絕對計數為639.30±270.77個/μl全血,CD4/CD8比值為1.86±0.80。
3、討論
兒童由于其機體發育未完全成熟,與成年人相比,其免疫系統各淋巴細胞群體在相對及絕對數值上都存在著一定的差異,因此臨床兒科領域需要有不同于成年人的淋巴細胞群體的相對及絕對的正常參考值。