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  • 發布時間:2023-05-25 10:25 原文鏈接: 流式細胞術原理

    FSC通道
    FSC,即前向角散射,它的值代表細胞的 大小 。所以可以利用細胞的FSC值初步比較細胞的大小,利用FSC值對細胞進行分群和分類。

    SSC通道
    SSC,即側向角散射,它的值代表 細胞的顆粒度 (granularity)。細胞越不規則,細胞表面的突起越多,細胞內能夠引起激光散射的細胞器或者顆粒性物質越多,其SSC值就越大。所以可以利用細胞的SSC值初步比較細胞的顆粒度,利用SSC值對細胞進行分群和分類。

    檢測樣品中是否含有細胞表達某一CD分子——標記熒光素偶聯的該CD分子的抗體——表達有該CD分子的細胞就會結合熒光素偶聯抗的該CD分子的抗體——熒光素被相應的激光激發后產生熒光——熒光通道值反映接收到的熒光信號的強弱,——反映細胞上結合的熒光素的量,反映細胞上表達該CD分子的量——間接反映細胞表達某CD分子這一化學特征
    不同細胞群的FSC值和SSC值最多相差幾倍,而熒光信號強弱之間一般相差很大,陰性細胞與陽性細胞之間、強陽性與弱陽性之間有時可以相差幾十倍、幾百倍,甚至幾千倍,呈指數關系。 流式圖數軸上FSC值和SsC值以“一般數序形式”表示,而熒光通道值常以“對數形式”(logarithmic scale)表示

    流式直方圖的x軸表示一個通道的值,y軸表示細胞數量。

    流式直方圖只能表示一個通道的信息,而流式散點圖能夠同時表示兩個通道的信息,可以非常直觀地發現細胞群體中這兩個通道值的相互高低關系,從而更易于細胞分群、分類,以及確定比例關系等。
    流式散點圖也是采取坐標軸的方式,x軸表示一個通道的值,y軸表示另一個通道的值,圖中每一點代表一個細胞,該點所對應的橫坐標值就是該點所代表細胞的x軸通道的值,所對應的縱坐標值就是該點所代表細胞的y軸通道的值。

    環線聚集越多的地方表示此區域細胞密度變化越快,細胞最稀疏的地方還是用散點表示,環線的中央區域代表細胞聚集的中心
    流式等高線圖比流式散點圖更能直觀地體現細胞的分群。


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