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  • 發布時間:2019-09-30 16:58 原文鏈接: 流式細胞術的應用

    (一)流式細胞術在細胞生物學中的應用

    流式細胞術最早被應用于生物學研究領域,就是生物細胞周期和動力學的分析。近年來,DNA倍體分析已經越來越廣泛應用于臨床和基礎研究,發揮越來越重要的作用。

    1. 有利于腫瘤的早期診斷和鑒別診斷 良性腫瘤或良性增生時不會出現非整倍體細胞(DI>1),而惡性腫瘤則伴有相當數量的非整倍體出現,相當部分癌前病變也有非整倍體的出現。所以非整倍體細胞是判斷腫瘤惡變的一個重要標志。

    2. 有利于判斷腫瘤的預后 有學者研究發現惡性腫瘤組織學分級越高,出現非整倍體或異倍體的比例越大,更容易出現轉移,預后也越差。

    3. 有利于判斷藥物對細胞周期的影響 流式細胞術可以快速判斷藥物作用細胞周期的時相,結果客觀可靠。例如推測某種藥物作用于細胞的DNA合成期,通過流式細胞儀的檢測,發現G2/M期數量減少,則有力地支持了推測的正確性。

    (二)流式細胞術在凋亡研究中的應用

    應用流式細胞儀檢測凋亡細胞是細胞凋亡研究的新手段,常用方法有:

    ①碘化丙啶(PI)染色法是目前最常用的方法。由于凋亡細胞DNA被降解,導致對DNA染料著色能力下降,用PI熒光染料對DNA降解進行測定,分析細胞周期的改變,觀察是否有亞二倍體細胞出現。②連接素Ⅴ(Annexin V)/PI雙染色法:早期凋亡細胞因細胞膜的磷脂對稱性改變而使磷脂絲氨酸暴露于細胞膜外,而Annexin V對PS有極強的親和性,PI對凋亡早期細胞膜完整的細胞拒染,而凋亡晚期的繼發壞死細胞可同時被AnnexinⅤ與PI標記,正常活細胞均不被二者染色。因此利用流式細胞儀可作雙參數測定,定量分析正常活細胞、壞死細胞和凋亡細胞數。

    (三)流式細胞術在免疫學中的應用

    1. 淋巴細胞表面標志的檢測。

    2. 流式細胞術在白血病和淋巴瘤免疫分型中的應用。

    3. 流式細胞術在血栓與出血性疾病中的應用:①血小板功能的測定;②血小板相關抗體的測定。

    4. 通過FCM檢測移植后CD34+/CD33+造血干細胞

    思 考 題

    1. 如何獲取滿意的流式細胞術樣品?

    2. 流式細胞術在腫瘤學中有哪些方面的應用?

    (張文敏) 



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