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  • 發布時間:2020-07-14 09:58 原文鏈接: 流感疫苗生產的純化過程和設備

    流感疫苗生產的純化過程:

    1.       已培養好的帶病毒的雞胚用75%酒精消毒;

    2.       收集雞胚尿囊液:根據雞蛋大小收集量略有不同(每只6-10ml);

    3.       尿囊液初濾JST型10μm濾芯過濾;

    4.       連續流離心機或超濾系統過濾

    a.  連續流離心機:日立R13C,用12,000rpm,流量:每分鐘600-800ml,除去雜質,上清液用于透析濃縮;

    b.  Millipore超濾系統,0.45μm濾膜,除去雜質

    5.       尿囊液的透析濃縮:用Millipore超濾器,1000KD膜包濃縮,濃縮后通常為尿囊液量的1/30;

    6.       超速離心的病毒純化(略);

    7.       福爾馬林脫毒;

    8.       乙醚裂解;

    9.       100KD透析脫糖;

    10.   去福爾馬林;

    11.   去乙醚……

    12.   幾種流行病毒抗原的混合(如H1N1+H3N2+H2N2)和稀釋

    13.   加入穩定劑

    14.   成品

     

    離心純化需要準備的儀器和基本材料:

    1.       儀器

    a.  阿貝折射儀 Abbe  refractometer (測蔗糖濃度)

    b.  Cole parmer 軟管泵:KH-77913-25

    c.  紫外分光光度計或核酸蛋白分析儀(有280nm,260nm波長的),可以是帶流動池及記  錄儀,也可以是帶標準樣品池的)

    2.       梯度液

    a.        PB緩沖液PH7.3

    b.       30% w/w蔗糖液(Sucrose,Sigma,AR級)

    c.        55% w/w蔗糖液

    d.       58% w/w蔗糖液

    3.       實驗器具

    a.        50ml有刻度玻璃管    100支

    b.       500ml有刻度燒杯     5支

    c.        100ml有刻度燒杯     5支

    d.       1000ml有刻度量筒    3只


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