隨著現代信息技術和醫學生物學,特別是醫學分子生物學的發展,醫學微生物學檢驗技術近年來獲得了長足的進步,并逐漸成為指導臨床感染診斷和治療的重要依據。然而,目前我國的醫學微生物學檢驗事業遠未達到令人滿意的程度,還有許多問題需要我們去思考、研究和解決。
本期嘉賓：徐州醫學院附屬醫院 檢驗科副主任 顧兵
《醫學儀器與試劑》（一下簡稱“《醫》”）：您的實驗室在質譜技術的應用上有哪些項目，能不能給我們用實例談一下質譜檢測的優勢、特點等？
顧兵：
1975年，Anhalt和Fenselau兩位學者首次提出將該技術用于細菌鑒定。上世紀80年代，研究人員不斷完善質譜檢測技術；直至上世紀90年代末，基質輔助激光解析電離飛行時間質譜（Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Time of Flight Mass Spectrometry, MALDI-TOF MS）開始成功用于細菌及真菌的鑒定。
近年來，質譜技術相繼通過美國FDA和中國CFDA的認證，MALDI-TOF質譜檢測技術在臨床微生物檢驗領域有著廣闊的應用前景。質譜技術在鑒定微生物的最主要優勢是可到達快速病原菌鑒定的目的，相對于傳統微生物培養方法，質譜儀可以在數分鐘內報告鑒定結果。目前本實驗室在質譜技術上的應用有兩個方面：（1）臨床罕見細菌的鑒定：包括常規培養、生化反應不能準確鑒定出的細菌；特殊標本中檢出的特殊病原菌；（2）科研方面：包括耐藥菌株蛋白組學；聯合分子生物學方法對耐藥菌株的耐藥機制研究。
對于微生物病原體鑒定這一感染診斷的關鍵環節，MALDI-TOF質譜鑒定將會逐步取代傳統的生化方法，成為微生物鑒定的主流方法和標準。同時，也將推動和提速微生物實驗室的全面自動化與工作流程優化，真正改變微生物實驗室的面貌，對感染疾病診療和抗生素合理使用與管理提供更加有力的支持。質譜技術是臨床微生物領域的革命性技術，希望各臨床微生物工作人員要注意加強學習，了解這一最新動態。
《醫》：微生物快速培養檢測對小兒肺炎支原體感染診斷的價值及經驗？
顧兵：
微生物培養與鑒定一直是診斷微生物相關感染的金標準，小兒肺炎常見的是支原體肺炎，因此微生物快速培養檢測對小兒肺炎支原體感染診斷十分必要，相比于快速血清檢測的方法，在檢測陽性率、以及診斷準確定性方面具有重要的價值，并且可以彌補快速血清檢測方法在較小年齡肺炎支原體感染患兒（1歲以下）陽性率低的不足。必要時，可以聯合應用。
《醫》：MIC測定及臨床應用評價？
顧兵：
MIC的測定可以非常直觀的反映細菌對不同抗菌藥物的耐藥水平，相對于K-B法，在指導臨床用藥劑量方面更有價值，無論是對于劑量依懶性藥物還是時間依懶性藥物，都可根據MIC值進行調控。另外，分離自不同個體間的菌株對不同抗菌藥物敏感性不同，可充分體現個體化用藥的原則。
《醫》：臨床細菌學檢驗在質量控制上存在盲區，以您的經驗，能不能談一談您覺得最應該注意的一些點？
顧兵：
雖然我們非常注重病原菌鑒定及藥敏的質控，但是，依然存在一些相對的“盲區”。比如：標本的采集與送檢。這涉及科室多、人員多、人員層次不一，是微生物正確檢驗的前提，也是微生物檢驗質量控制難點。目前，微生物培養的痰標本約有50%是不合格標本。因此，如何與臨床醫生及患者溝通，如何制作詳細的通俗易懂的標本采集說明，提升標本質量，是檢驗人應該努力的方向。目前，智能手機和互聯網的普及，我們可以考慮制作簡短的視頻，讓患者一目了然，知道如何留取高質量的標本。
影響標本的質量還有一個被大家所忽視的因素就是標本采樣工具和轉運系統。包括容器、運輸介質、采樣工具、包裝和運輸環境等。在過去的幾十年里，國際上臨床微生物標本轉運介質及工具發展迅速，國際上一些知名醫院開始逐步采用新型標本采集拭子與轉運系統，如筆者2012年訪問學習的美國加州大學洛杉磯分校（University of California Los Angeles, UCLA）正在切換使用新型的標本采集拭子與轉運系統，以提高臨床微生物檢驗質量。然而由于新型臨床微生物標本采集拭子及轉運系統成本較高，以及國內臨床微生物檢驗收費普遍較低等因素，國內絕大數醫院的臨床微生物實驗室還沒有開始使用新型標本采集拭子及轉運系統。近年來，微生物檢驗的標準化和自動化已成為各個實驗室的發展方向。自動化的檢驗能夠提高檢驗質量，提高檢驗效率，減少人為誤差，并能夠節省人力，提高生物安全性等。采用方便、快捷、高性能的標本轉運系統在自動化的進程有重要意義。
《醫》：您對微生物技術的發展趨勢是如何看的？
顧兵：
從臨床的需求角度來看，臨床微生物檢驗最大的問題就是報告發放的速度太慢，培養及藥敏短則需要3天，長則需要數周，難以滿足臨床的需求。所以與傳統微生物檢測方法相比，臨床微生物檢驗技術的發展未來趨勢主要是向“快”和“精準”兩個方面發展。
“快”，故名思義，就是以最快的速度來進行細菌的鑒定和藥敏。目前，采用質譜技術已經可以達到快速鑒定病原菌的目的，但尚不能解決快速藥敏的檢測。因此，未來質譜技術的一個重要的發展方向就是用于臨床藥敏的快速檢測。
“精準”也很容易理解，就是說病原菌的培養、鑒定和藥敏，僅僅有速度是不夠的，還必須準確。這就需要我們不斷加強學習、正確地采用各種臨床微生物檢驗技術，做好質量控制，從而方能得到精準的報告。
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