第一步：預先打開培養箱開關，設定溫度為20℃(要求培養箱的恒溫變化幅度為±1℃)。
第二步：加熱或冷卻樣品至實驗溫度（一般為20℃），溫度波動范圍在±2℃之內。
第三步：曝氣1小時或攪拌半小時使水樣的溶解氧達到飽和（在20℃左右環境下）。
第四步：每升水樣添加1mL B1試劑、3mL B2試劑，如有需要可添加2mL硝化抑制劑。
第五步：根據量程用量筒準確量取經預處理PH在7.2左右的水樣。
第六步：將水樣通過漏斗轉入培養瓶中。
第七步：將清潔的攪拌轉子裝入培養瓶中。
第八步：將清潔的密封杯裝入培養瓶內。（為保證密封可以在密封杯上下兩側涂適量真空硅脂）。
第九步：通過漏斗向密封杯內裝入3/4勺（約0.6g）CO2吸收劑。
第十步：擰緊與培養瓶編號對應的瓶蓋，將培養瓶按順序放在測定儀主機上。
第十一步：將測定儀主機小心緩慢移入培養箱內，將電源線連接，并打開開關進行參數設置。
第十二步：實驗完成后應將培養瓶、密封杯及攪拌轉子徹底清洗干凈，待用。