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  • 發布時間:2021-09-20 10:08 原文鏈接: 測定細胞增殖用CCK8好不好

    CCK-8的英文全稱是Cell Counting Kit-8,也就是進行細胞計數的一個盒子。那它的用途也就大致可以猜到,和細胞增殖、細胞毒性相關的實驗都可以。
    CCK8的原理:在CCK-8試劑盒中,最主要的化學藥品是WST-8,化學名為2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽。它的核心基團和MTT是一樣的,是MTT的升級版本。在電子耦合試劑(也就是細胞是活的,有呼吸,有能量代謝)存在的情況下,可被NAD+氧化還原成為水溶性的黃色甲瓚產物(Formazan)。活細胞越多,產生的Formazan就越多,顏色也會越深。所以粗略的可以認為生成的甲瓚物的顏色的深淺與活細胞的數量成正比。為什么是粗略的呢,因為這里沒有考慮到細胞代謝水平的高低,有些細胞在藥物處理后,可能活細胞數不變,但是代謝率低了以后,細胞呼吸減弱,NAD+產生減少,測出的Formazan也會減少。

    CCK8的用途

    1.細胞增殖測定:細胞增殖實驗在很多領域都會用到,比如腫瘤相關、損傷后修復等。
    2.藥物篩選:在測定一個藥物的毒性和安全有效濃度時,經常會用到CCK-8。
    3.細胞毒性測定:這個可以和各個處理因素對細胞活性和增殖的影響,比如在UV、低氧或者什么化學物品對細胞的影響上。
    4.腫瘤藥敏試驗:這個是用的比較廣的,我見過做腫瘤的團隊,買CCK-8都是一整箱,一整箱的買。
    5.微生物對細胞的毒性或增殖的實驗。

    優點:
    1.酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾;
    2.細胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀數從而找到最佳測定時間。

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