測定苯甲酸分光光度計法實驗設計

紫外分光光度法測定苯甲酸

一 實驗目的

1.       掌握吸收曲線的測定與繪制方法

2.       學習運用直接比較法求樣品含量

3.       掌握752型分光光度計的使用方法

二 基本原理

樣品中的苯甲酸在堿性條件下形成苯甲酸鹽。苯甲酸及其鹽對紫外光有選擇性吸收，其吸收光譜的最大吸收波長在225nm左右。

用752型分光光度計可測定物質在紫外光區、可見光區的吸收光譜，并可定量測定物質含量。

三 儀器與試劑

（一）   儀器

752型分光光度計，25px石英吸收池一套，50ml容量瓶二只，刻度吸管5ml、10ml各一支，滴管一支

（二）   試劑

0.01mol/L NaOH溶液；

苯甲酸標準貯備液：精確稱取分析純苯甲酸100mg（預先經105℃烘干），用0.1mol/LNaOH溶液100ml溶解后，再用蒸餾水稀釋至1000ml。此液1ml相當于0.1mg苯甲酸。

苯甲酸標準溶液：取苯甲酸貯備液4.00ml，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/LNaOH溶液定容，搖勻。此液1ml相當于8μg苯甲酸。

四 操作步驟

1.       苯甲酸吸收曲線的繪制

測定條件：氘燈，25px石英比色皿，苯甲酸標準溶液，0.01mol/LNaOH為參比液

測定波長（nm）：從210nm~240nm每隔一定波長（2nm~5nm）測定一次吸光度，在225nm左右隔1nm測定一次吸光度。用以上波長為橫坐標，測得的吸光度為縱坐標繪制苯甲酸的紫外吸收曲線。

2.       直接比較法測定樣品溶液中苯甲酸的含量

取10.00ml樣品溶液，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/LNaOH溶液定容，搖勻后備用。

   在上述吸收曲線中找出最大吸收波長，用此波長作為定量分析的測定波長。以0.01mol/LNaOH溶液為參比液，在完全相同的條件下測定苯甲酸標準溶液和稀釋后樣品溶液的吸光度。

五 數據處理 按下式計算樣品溶液中苯甲酸的濃度：

式中C_x是待測樣品液的濃度；C_s是苯甲酸標準液的濃度；A_x是待測樣品液的吸光度；A_s是苯甲酸標準液的吸光度。

六 注意事項

1.       在測定時應將光閘拉出，不測定時立即將光閘推入，以保護光電管。

2.       當外界電壓波動較大時要用電子交流穩壓器，且隨時觀察并校正暗電流。