實驗材料 動物組織
試劑、試劑盒 乙酸乙酯丙酮甲醇乙腈
儀器、耗材 離心管雞心瓶SCX柱
實驗步驟
1. 提取
稱取5 g（準確至0.01 g）樣品于50 mL離心管中，加入20 mL乙酸乙酯，均質1 min后，超聲提取5 min，再以3000 r/min的速度離心10 min，取上清液轉移至雞心瓶中。再用20 mL乙酸乙酯重復提取一次，合并上清液于同一雞心瓶中。
2. 凈化
將提取液于40 ℃下旋轉蒸發至近干（不能全部蒸干），用5 mL乙酸-乙酸乙酯（5 + 95）溶解，將溶液轉移到預洗過的SCX柱上的貯液器中，再用 5 mL乙酸-乙酸乙酯（5 + 95）洗雞心瓶，洗液一并轉移到SCX柱【經5 mL乙酸-乙酸乙酯（5 + 95）預洗】上的貯液器中，打開活塞，以2 mL/min流速滴下。依次用2.5 mL丙酮、5 mL甲醇、5 mL乙腈在2 mL/min流速下淋洗柱子，用5 mL氨水- 乙腈（5 + 95）洗脫。棄去前2 mL，收集后面的洗脫液于玻璃管中，在40 ℃水浴上用氮氣小心吹干，用水定容至1 mL，旋渦振蕩或超聲溶解，過0.45 um濾液膜后， 進行HPLC分析。
3. 液相色譜條件
流動相：
A：水；
B:乙腈；
C:甲醇。