全自動生化分析儀的連續監測法是什么呢?連續監測法又稱速率法。即連續監測反應過程,根據所測定的產物生成或底物消耗的速度進行定量分析的方法。在反應時間進程曲線上為反應呈恒速區段(斜率保持不變),常用于酶活性線性反應期測定。sxhlfhf
1.連續監測法即零級反應速率法,亦稱斜率法。在較長的反應時間區段內(至少90-120秒),每隔一定時間(常為2~30秒)讀取一次吸光度值,至少讀取4點,得到3個△A;一般將連續多次讀數作小二乘法處理,讀數間隔時間太短的作帶速率時間(TR)多點法處理,均取線性反應部分的讀數,求出單位時間內的反應速率△A/min。此法必須以零級反應為測定計算的基礎,因為只有在零級反應下,單位時間內的吸光度變化(反應速率△A/min)才與酶活力呈正比。此法相對減少了分析誤差,大大提高了分析速度和準確性。但是,半自動生化分析儀采用單樣品連續監測,相當耗時。應用連續監測法,首先應準備線性范圍內的高、中、低濃度的樣品,分別作反應時間進程曲線,了解不同濃度下反應全過程,兼顧確定延遲時間和線性監測期。
2.兩點速率法即所謂擬一級速率法。在反應中選取兩時問點t1、t2,讀取吸光度A1、A2,計算(A2-A1),(t2-t1)=△A,△t。此方法與終點兩點法的區別主要有兩點:后一讀數點反應未達終點,以速率計算結果。它與連續監測法比較,缺點在于人為確定t1、t2,不定因素較多,不能保證反應在t1-t2期間呈線性,影響結果準確性;應在常規測定前,先做預試驗來確定線性時間段。若在選擇的時間段內反應不成線性(如零級反應期短,儀器無法設置或測定),則只能改用終點法。優點在于方法簡單;酶活力較低、測定吸光度值較小時,可增加測定時間段而不受儀器連續監測時間點的局限,減少讀數誤差。
3.速率B法在一個通道內一次進行兩項反應相關的速率法測定。它既可以是兩項試驗測定,也可用于干擾或及樣品空白自動補償0后一用途的原理是:利用儀器的微機自動處理,在*反應(干擾反應)一直維持線性的前提下,可以從第二反應(主反應)速率中扣除*反應速率的延續影響。如用于消除膽紅素轉化為膽綠素吸光度下降、對肌酐苦味酸法測定的負干擾等。某些儀器設置此方法。
以上就是全自動生化分析儀檢測過程中用到的連續監測法,海力孚品牌全自動生化分析儀除了采用了這種方法外,還有終點法、動力學法、免疫比濁法、固定時間法和雙試劑法等,是醫院常用的檢測設備。