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  • 發布時間:2019-04-09 20:49 原文鏈接: 消化系統的顯微結構觀察實驗

    1.觀察味蕾的結構。

    2.比較觀察漿液腺泡、粘液腺泡和混合腺泡的結構特點。

    3.通過觀察食管、胃及小腸切片來了解消化管管壁的分層和一般組織結

    實驗材料

    胃小腸肝小葉組織結構模型

    儀器、耗材

    舌輪廓乳頭切片葉狀乳頭切片下頜下腺切片食管切片胃體部切片十二指腸或空腸切片結腸切片小腸切片胰切片肝切片肝血管注射切片肝活體染色切片肝切片膽小管切片胃底腺小腸上皮細胞切片肝細胞的電鏡圖片

    實驗步驟

    一、味蕾

    用人舌的輪廓乳頭或兔舌的葉狀乳頭切片(H-E染色)觀察。

    1.低倍鏡觀察 找到粘膜的突起部分即舌乳頭,可見其上皮為復層扁平上皮,上皮內有許多著色淺的卵圓形味蕾。兔舌的葉狀乳頭處的味蕾較多,所以容易找到。

    2.高倍鏡觀察 味蕾為卵圓形,其長徑與所在部位的上皮厚度相等。味蕾內有3種細胞:I 型細胞呈梭形,數目少.胞核狹長,著色較深;Ⅱ型細胞為梭形或柱狀,數目較多,胞核大而圓,染色淺;Ⅰ、Ⅱ型細胞頂端都有味毛,隱約可見。基細胞為錐體形,位于味蕾基部。若切面正切過味蕾的中部,還可見到味蕾頂端的味孔。

    二、唾液腺的漿液、粘液和混合腺泡

    用狗的下頜下腺切片(H-E染色)觀察。只要求觀察3種腺泡的結構特點。

    (一)低倍鏡觀察

    可見腺組織被結締組織分隔成許多小葉,在小葉內可見許多腺泡和少數導管。

    (二)高倍鏡觀察

    在高倍鏡下尋找3種腺泡。

    1. 漿液腺泡 腺泡形狀近似圓形,腺腔很小。胞體呈錐形,胞質著色較深,呈紫紅色。胞核圓形,位于細胞基部。

    2.粘液腺泡 腺泡形狀為長橢圓形,比漿液腺泡人。胞質著色淺淡,呈淺藍紫色胞核扁與圓形,位于細胞基底部,接近細胞膜。

    3. 混合腺泡 在粘液腺泡的末端附著有幾個排列成半月形的漿液腺泡細胞。

    三、食管

    觀察食管、胃、小腸和結腸切片的肌層時,要注意這張切片是縱切還是橫切,因為,在不同的切面上所看到的肌層的肌纖維排列方向有所不同。

    用低倍鏡觀察人的食管切片(H-E染色)。管壁由食管腔向外依次可分為粘膜、粘膜下層、肌層及外膜四層。黃

    1.粘膜粘膜可分二層:上皮為復層扁平上皮;固有層為結締組織;粘膜肌層為縱行平滑肌,較厚。

    2.粘膜下層 粘膜下層染色較淺,為疏松結締組織,可見食管腺為粘液腺和混合腺。于

    3.肌層 食管的肌層很厚,大致分內環肌、外縱肌兩層。觀察并判斷你所觀察的切片,食管肌層是哪種肌纖維?

    4.外膜 食管外膜為纖維膜,是一層疏松結締組織。

    在以上各處的結締組織中,都可看到血管和神經的斷面。

    四、胃

    取貓或狗的胃體部切片(H-E染色),并結合胃組織結構模型重點觀察胃底腺的結構。

    (一)低倍鏡觀察

    區分粘膜、粘膜下層、肌層及外膜四層。可見胃的粘膜面呈乳頭狀的粘膜隆起為粘膜皺璧,它由粘膜及粘膜下層組成。

    1.粘膜 表面為單層柱狀上皮,上皮凹陷形成短而闊的胃小凹。上皮細胞的頂部胞質內含有粘原顆粒,在H-E染色切片中此顆粒被溶解,使頂部呈空泡狀。

    固有層為疏松結締組織,其中有大量胃底腺,排列緊密,故腺間固有層結締組織很少胃底腺為單管腺或分支管狀腺,開口于胃小凹。在切片上,胃底腺被切成縱、橫、斜各種切面

    粘膜肌層較薄,為內環肌、外縱肌的平滑肌。

    2.粘膜下層 為疏松結締組織,含有豐富的血管和神經。

    3.肌層 很厚,由平滑肌組成,分內斜肌、中環肌、外縱肌三層。前兩層界限不易分清。

    4.外膜 為漿膜,即在薄層的疏松結締組織外還覆有一層單層扁平上皮(間皮)。

    (二)高倍鏡觀察

    觀察組成胃底腺腺泡的幾種細胞。在H-E染色切片中只能區分以下三種細胞:

    1.壁細胞 很大,近似圓形。胞核大而圓,位于中央。胞質為強嗜酸性,被伊紅染成深紅色。

    2.主細胞 位于壁細胞之間,數日最多,呈柱狀。胞核圓形,位于細胞基部。胞質嗜堿性,染成藍色,細胞界限不清楚。

    3.頸粘液細胞 數量少,位于腺的頸部,多呈楔狀,胞核扁圓,位于細胞基部,胞質著色淺。

    (三)示范觀察壁細胞和主細胞的電鏡結構

    用胃底腺的透射電鏡圖片觀察。壁細胞胞質中有迂曲分支的細胞內分泌小管,管壁與細胞頂面的胞膜相連,有微絨毛,線粒體豐富,其他細胞器不發達。主細胞的核周有大量粗面內質網與發達的高爾基復合體,胞質頂端有許多圓形的酶原顆粒。

    五小腸

    (一)人十二指腸或空腸切片(H-E染色)和小腸組織結構模型的觀察

    重點觀察小腸絨毛及小腸腺的結構。

    1.肉眼觀察 可見粘膜面有數個大突起突向管腔,為粘膜皺襞。它由哪些結構構成?

    2.低倍鏡觀察 先粗略地觀察一下小腸壁的分層,然后再一層一層仔細觀察。

    (1)粘膜在整個腸粘膜表面(包括粘膜皺襞的表面)布滿許多不規則的細小指狀突起,即為小腸絨毛。在切片上,小腸絨毛往往被切成縱、橫、斜等各種切面。小腸絨毛表面為單層柱狀上皮,上皮深面為固有層的疏松結締組織。

    在粘膜固有層內可見很多腸腺。腸腺為單直管狀腺,常被切成縱、橫、斜等切面。腸腺開門于小腸絨毛之間,可以在切片中找到。腺泡由單層柱狀上皮組成,中間的腔隙即腺腔。

    固有層中有時可見染成藍紫色的分散淋巴組織或淋巴小結。

    粘膜肌層為平滑肌,此層較薄,雖分為內環肌、外縱肌兩層,但往往不易區分。

    (2)粘膜下層 為疏松結締組織。若觀察十二指腸切片,則在此層中可見十二指腸腺,為粘液腺。在靠近肌層處可見到數個胞核大而圓的細胞群,它是粘膜下神經叢中的副交感節后神經元。

    (3)肌層 為平滑肌,排列成內環肌、外縱肌兩層。在環肌和縱肌之間的結締組織中,同樣可見到胞核大而圓的細胞群,這便是肌間神經叢中的副交感節后神經元。

    (4)外膜 十二指腸大部分為一層疏松結締組織的纖維膜,空腸為漿膜,即在疏松結締組織外還覆有一層間皮。

    3.高倍鏡觀察 找一條縱切得比較直的小腸絨毛觀察其結構。小腸絨毛表面為一單層柱狀上皮,上皮細胞游離面有紋狀緣。柱狀細胞(吸收細胞)之間散布有杯形細胞。上皮深部是結締組織,在其中散布有與小腸絨毛長軸平行的平滑肌纖維。小腸絨毛固有層中心可見到一條由層內皮構成的中空管道,即中央乳糜管,在切片中多被切成各種斷面。由于制作切片時取材的關系,有時甚至整張切片上都看不到中央乳糜管。在中央乳糜管周圍可以看見很多毛細血管的各種斷面。

    用高倍鏡觀察腸腺,可見它也由柱狀細胞(吸收細胞)和杯形細胞組成。在有的H-E染色切片中甚至還可區分出腸腺底部的帕內特細胞(Paneth cell)。這種細胞的頂部有被染成深紅色的顆粒。

    (二)示范觀察貓小腸切片(銀染色)

    用低倍鏡找到腸腺,再換用高倍鏡觀察。可見在腸腺的吸收細胞之間,散布有數目不多、呈黑色的小腸內分泌細胞(嗜銀細胞)。

    (三)示范觀察微絨毛結構

    用小腸上皮細胞透射電鏡圖片觀察微絨毛結構。

    六、結腸

    用人的結腸切片(H-E染色)低倍鏡觀察。重點觀察其粘膜結構并與小腸粘膜進行比較。結腸腸壁也分四層,粘膜無腸絨毛,但有很多腸腺。腸腺為單直管腺,在切片上被切成縱、橫、斜各種切面。觀察時不要把兩個相鄰近的腸腺誤認為是一條腸絨毛。上皮中杯形細胞很多。若切片切到淋巴小結,可以在固有層中看到,它常擴展伸至粘膜下層。

    七、胰

    取人或豚鼠胰切片(H-E染色)觀察,重點區分腺泡及胰島,并了解胰島結構。

    1.低倍鏡觀察 可見少量結締組織伸人胰腺實質內,將胰分成很多小葉。小葉內有許多染色較深的漿液腺泡及少數小葉內導管,這些是胰的外分泌部。在腺泡之間可見大小不一、色淡的細胞團為胰島,它是胰的內分泌部。在胰的結締組織中,有時可切到環層小體,它為內臟感受器。

    2.高倍鏡觀察 漿液腺泡的結構基本上和唾液腺的相似。不同之處是在腺泡腔中可見立方形或較扁的小細胞,為泡心細胞,其胞核扁圓,胞質著色較淡。

    胰島細胞排列成團索狀,并彼此連接成網。細胞間散布有毛細血管。胰島細胞的胞核都為圓形,在H-E染色切片中著色較深的為A細胞。在胰島內還有一些染色較深、扁平或梭形的成纖維細胞夾雜其間。要用特殊染色才能區分出A、B、D細胞。

    八、肝

    (一)肝切片的觀察

    取豬的肝切片(H-E染色)并結合肝組織結構模型觀察

    1.低倍鏡觀察 可見許多多邊形的肝小葉,小葉間有結締組織分隔,豬肝小葉分隔比人肝清楚。每個小葉中心有一中央靜脈。肝細胞以中央靜脈為中心,單行排列成凹凸不平的板狀結構(肝板)。但在切片上肝板呈向小葉周邊作放射狀排列的索,稱為肝索。肝索分支相互聯接形成網狀。肝索之間的不規則空隙即肝竇。用肝組織結構模型觀察更易理解上述結構。

    肝小葉間有一些近似三角形的結締組織區域,其中有三種伴行的管道〔小葉間膽管、小葉間動脈及小葉間靜脈),為門管區。

    2.高倍鏡觀察 選擇一比較清晰的肝小葉用高倍鏡進一步觀察肝索及肝竇結構。

    肝細胞體積比較大,呈多角形,胞核圓形,位于細胞中央,有時可見雙核的肝細胞。肝竇的壁由扁平的內皮細胞組成,胞核扁圓形,突入于管腔內。在肝竇內可看到血細胞。

    根據管壁結構在門管區辨別三種管道。小葉間膽管由單層立方或柱狀上皮組成,上皮細胞的胞核明顯,胞質染色淺淡,所以很容易與小葉間動脈和靜脈區分開來。由于這三種管道都可能有分支,因此有時在同一門管區內可見到一個以上的小葉間膽管、小葉間動脈或小葉間靜脈的斷面。

    (二)示范觀察貓肝血管注射切片

    這種切片是從肝門靜脈處注射色劑制作的,所以在低倍鏡下觀察可清晰地顯示肝竇的分支吻合成網和與肝小葉中央靜脈的連接,同時還可以看到小葉間靜脈及小葉下靜脈。

    (三)示范觀察兔肝竇的肝巨噬細胞

    肝巨噬細胞,又稱枯否細胞(Kupffer’s cell)。用活體染色方法制作的肝切片觀察。高倍鏡下觀察可見有一些形狀不規則的肝巨噬細胞內含有吞噬的活體染料顆粒。顆粒的顏色隨所用的活體染料的不同而異。制片時如使用臺盼藍進行活體染色,則可見顆粒為藍色;如使用中性紅(neutral red)或洋紅(carmine)染色,則顆粒為紅色。

    (四)示范觀察用PAS反應制作的兔肝切片

    高倍鏡下觀察可見肝細胞內含有豐富的紫紅色的糖原顆粒。

    (五)示范觀察經膽管注射硝酸銀制作的兔肝切片 這種切片是用硝酸銀經肝的膽管注射制作的。低倍鏡下觀察可見肝小葉內有許多呈黑色的小分支,分支互相吻合成網,這些黑色小分支即膽小管。在這種切片上,肝細胞不顯現顏色。

    (六)示范觀察肝細胞電鏡結構

    用肝細胞透射電鏡圖片觀察。肝細胞胞質中各種細胞器都較發達,胞核位于細胞中央。注意觀察肝細胞三種相鄰面的結構。

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