流動相為液體，固定相為吸附劑（如硅膠、氧化鋁等）。這是根據物質吸附作用的不同來進行分離的醫學教育|網。
其作用機制是：當試樣進入色譜柱時，溶質分子（X）和溶劑分子（S）對吸附劑表面活性中心發生競爭吸附（未進樣時，所有的吸附劑活性中心吸附的是S），可表示如下：Xm nSa ====== Xa nSm
式中：Xm——流動相中的溶質分子；Sa——固定相中的溶劑分子；Xa——固定相中的溶質分子；Sm——流動相中的溶劑分子。
當吸附競爭反應達平衡時：K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]式中：K為吸附平衡常數。