液體石蠟法

亦稱礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜面培養基上，最適條件下培養至菌種長出健壯菌落后注入滅菌的液體石蠟，使其覆蓋整個斜面，再直立放置于低溫（4～6℃）干燥處進行保存的一種菌種保藏方法。

操作步驟如下：

1 液體石蠟的準備

選用優質化學純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進行滅菌：

121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發水分，經無菌檢查后備用。

160℃干熱滅菌2個小時，冷卻后，經無菌檢查后備用。

2 斜面培養物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件下注入培養好的新鮮斜面培養物上，液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏

4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時間2～10年。

4.2　保藏期間應定期檢查，如培養基露出液面，應及時補充無菌的液體石蠟。

5 恢復培養   恢復培養時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖后，再重新轉接一次。