液相色譜是近年來發展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術。它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣。液相色譜儀系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
液相色譜儀的工作過程:
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動時,經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀的的應用:
1、在食品分析中的應用
食品營養成分分析:蛋白質、氨基酸、糖類、色素、維生素、香料、有機酸(鄰苯二甲酸、檸檬酸、蘋果酸等)、有機胺、礦物質等;
食品添加劑分析:甜味劑、防腐劑、著色劑(合成色素如檸檬黃、莧菜紅、靛藍、胭脂紅、日落黃、亮藍等)、抗氧化劑等;
食品污染物分析:霉菌毒素(黃曲霉毒素、黃桿菌毒素、大腸桿菌毒素等)、微量元素、多環芳烴等。
2、在環境分析中的應用
多環芳烴(特別是稠環芳烴)、農藥(如氨基甲酸脂類,反相色譜)殘留等。
3、在生命科學中的應用
HPLC技術目前已成為生物化學家和醫學家在分子水平上研究生命科學、遺傳工程、臨床化學、分子生物學等必不可少的工具。其在生化領域的應用主要集中于兩個方面:
低分子量物質,如氨基酸、有機酸、有機胺、類固醇、卟啉、糖類、維生素等的分離和測定。
高分子量物質,如多肽、核糖核酸、蛋白質和酶(各種胰島素、激素、細胞色素、干擾素等)的純化、分離和測定。
4、在醫學檢驗中的應用
體液中代謝物測定;藥代動力學研究;臨床藥物監測:
合成藥物:抗生素、抗憂郁藥物(冬眠靈、氯丙咪嗪、安定、利眠寧、苯巴比妥等)、黃胺類藥等。
天然藥物生物堿(吲哚堿、顛茄堿、鴉片堿、強心甙)等
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