液相色譜分離系統包括色譜柱、恒溫器和連接管等部件。色譜柱是液相色譜儀的心臟部件,它包括柱管與固定相兩部分。柱管材料有玻璃、不銹鋼、鋁、銅及內襯光滑的聚合材料的其他金屬。玻璃管耐壓有限,故金屬管一般用內部拋光的不銹鋼制成用的較多。
色譜柱內徑為2~6mm(常用的標準柱型內徑為4.6或3.9mm),柱長為10~30cm,柱形多為直形,內部充滿微粒固定相,填料顆粒度5~10um,柱效以理論塔板數計,為7000~10000。柱溫一般為室溫或接近室溫。
一般在分離柱前備有一個前置柱,其填充物和分離柱完全一樣,使淋洗溶劑由于經過前置柱為其中固定相飽和,使它在流過分離柱時不再洗脫其中的固定相,保證分離柱的性能不受影響。柱子裝填的好與壞對柱效影響很大。對于細粒度的填料一般采用勻漿填充法裝柱,先將填料調成勻漿,然后在高壓泵的作用下,快速將其壓入裝有洗脫液的色譜柱內,經重洗后,即可備用。
在液相色譜中,分離柱的制備是一項技術要求非常高的工作,一般很少自行制備。其發展趨勢是減小填料粒度及柱徑和柱長,以提高分析速度和柱效。
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