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  • 發布時間:2020-03-24 20:34 原文鏈接: 液相色譜小知識

    高效液相經常使用粒徑5um 的色譜柱,用過一段時間后,柱壓會略有升高,尤其是做中藥。常用來洗色譜柱的溶劑為甲醇,當色譜柱用甲醇洗過之后,再用含乙腈的流動相平衡,會使柱壓迅速升高,色譜柱滴漏,這是由于甲醇和乙腈匯合產生局部高壓。因此,這種情況下,應慢慢升高流速,可以從0.6ml/min開始,一步步的平穩柱壓,防止色譜柱漏液。可能是因為:ODS柱上有未完全硅烷化的羥基,與甲醇結合性好,當遇到乙腈時,乙腈慢慢取代甲醇的位點,但是乙腈沒有羥基,結合性比甲醇差,所以產生了局部高壓。

    195-210mn之間的末端吸收的波長下檢測,干擾極大,往往得不償失,除非燈是新裝上的。可以考慮用ELSD檢測器,屬于通用型檢測器,只要條件控制得好,結果一般都很理想。而且ELSD可除去溶劑和流動相的干擾,要知道甲醇在205nm時,吸收度為0.667.在用ELSD做標準曲線的時候,不一定呈線性關系.

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