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  • 發布時間:2022-07-12 11:10 原文鏈接: 液相色譜柱嚴重拖尾該如何處理

    出峰快結束的時候又出來一個不全的峰,對于這種情況,很有可能是你的柱子不干凈,才用梯度洗脫法沖洗柱子。單元泵的話,用幾個不同比例的流動相沖洗柱子,至基線穩定。
    色譜柱走出來的峰型拖尾很嚴重,這個有好幾種原因:流動相的比例,如甲醇:水的比例不一樣,出峰時間和拖尾程度不一樣的,還有你的柱型是否和檢測物質匹配。我經常能遇到流動相的比例不同,分離度差別很大的情況。
    拖尾原
    因
    解決方法
    1、篩板阻塞
    1、a、反沖色譜柱
    b、更換進口篩板
    c、更換色譜柱
    2、色譜柱塌陷
    2、填充色譜柱
    3、干擾峰
    3、a、使用更長的色譜柱
    b、改變流動相或更換色譜柱
    4、流動相PH選擇錯誤
    4、調整PH值。對于堿性化合物,低PH值更有利于得到對稱峰
    5、樣品與填料表面的溶化點發生反應圖
    5、a、加入離子對試劑或堿性揮發性修飾劑
    b、更改色譜柱
    F、
    早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
    原
    因
    解決方法
    1、柱外效應
    1、a、調整系統連接(使用更短、內徑更小的管路)
    b、使用小體積的流通池
    G、
    K’增加時,脫尾更嚴重
    原
    因
    解決方法
    1、二級保留效應,反相模式
    1、a、加入三乙胺(或堿性樣品)
    b、加入乙酸(或酸性樣品)
    c、加入鹽或緩沖劑(或離子化樣品)
    d、更換一支柱子
    2、二級保留效應,正相模式
    2、a、加入三乙胺(或堿性樣品)
    b、加入乙酸(或酸性樣品)
    c、加入水(或多官能團化合物)
    d、試用另一種方法
    3、二級保留效應,離子對
    3、加入三乙胺(或堿性樣品)
    H、
    酸性或堿性化合物的峰拖尾
    原
    因
    解決方法
    1、緩沖不合適
    1、a、使用濃度50-100mM的緩沖液
    b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液
    I、
    額外的峰
    原
    因
    解決方法
    1、樣品中有其他組份
    1、正常
    2、前一次進樣的洗脫峰
    2、a、增加運行時間或梯度斜率
    b、提高流速
    3、空位或鬼峰
    3、a、檢查流動相是否純凈
    b、使用流動相作為樣品溶劑
    c、減少進樣體積

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