液相色譜柱的使用和保養

 反向色譜柱在經過出廠測試后是保存在甲醇（或乙腈）/水中的。請一定確保您所使用的活動相和甲醇（或乙腈）/水互溶，由于色譜柱在運輸過程中可能會干掉，因此在用活動相分析樣品之前，應使用分10-20倍的體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱：假如您所使用的活動相中含有緩沖鹽，應留意用含水量很高（約95%）的活動相過渡，樣品分析完后，沖洗柱子是亦然。過往傳統的方法使用純水沖洗，對于非極性柱，如C8或C18，由于純水不能浸潤填料表面而沖倒碳鏈，造成柱效下降。另外，分析樣品時，由于純水在填料表面不能浸潤形成水膜，出現樣品不保存而分不開，重現性差，所以對于一般的C18或C8，有機溶劑不能低于5%。硅膠柱或極性色譜柱在經過出廠測試后是保存在正庚烷中的。假如該色譜柱需要使用含水或甲醇或乙腈的活動相，請在使用活動相之前用乙醇或異丙醇平衡。    

如何平衡色譜柱：

    平衡過程中，將流速緩慢地進步用活動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線（緩沖鹽或離子對試劑濃度假如較低，則需要較長的時間平衡）。    

色譜柱的再生     

建議用來沖洗的溶劑體積

色譜柱規格 柱體積 溶劑體積

 150×4.6 2.50ml 50ml     

 250×4.6 5.0ml 100ml     

 250×10 20ml 400ml     

請根據下表選擇您的再生方法:    

極性固定相(如Si，NH2，Diol色譜填料)的再生：正庚烷—氯仿—乙酸乙酯—丙酮—乙醇—水 非極性固定相（如反向填料C18，C8等）的再生：水—乙腈—氯仿（或異丙醇）—乙腈—水        

色譜柱的維護     

1、使用保護柱    

2、大多數柱的PH穩定范圍是2-7.5，盡可能在此范圍內使用     

3、避免活動相組成及極性有劇烈變化     

4、活動相使用前必須經脫氣和過濾處理     

5、假如使用極性或離子性的緩沖溶液作活動相，要在實驗完畢將柱子沖洗干凈     

6、壓力升高時更換保護柱