液相色譜柱常見問題分析與解決方案

　　1.使用一段時間后柱壓過高：

　　解決方案：首先查看是否HPLC系統原因，排除系統原因后，原因基本是由于實驗過程中雜質在柱中的累積。盡量完善操作條件，做完樣品后要及時沖洗干凈，如緩沖鹽的流動相一定要用高比例的水溶液(如，90％)沖洗完全后再用有機相保存。

　　2.篩板堵塞與柱頭塌陷：

　　解決方法：如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力，或者卸下色譜柱頭，小心取下篩板，用5%左右的硝酸溶液超聲處理20分鐘左右，再用純水超聲20分鐘左右，重新裝入色譜柱。

　　3.色譜柱頭的填料被樣品污染：

　　解決方法：

　　如確定色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔細修復后，重新安裝上柱頭螺絲。

　　4.色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑，形成結晶析出：

　　解決方法：

　　如確定是鹽結晶，用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內鹽全部溶解，再換高濃度甲醇。

　　注意事項：

　　1.無論何時，必須保證色譜柱柱床不干涸，尤其是進樣檢測和柱沖洗過程中不能讓流動相長時間(30min以上)走空，否則易使色譜柱干涸且帶入大量幾乎無法排出的氣泡，甚至導致柱床局部塌陷或中部開裂。

　　2.使用與保存時，嚴禁用力甩，絕對杜絕不小心猛烈撞擊或高處掉落，否則，易導致柱床機械性損壞，則再無再生可能。

　　3.當柱子和色譜儀聯結時，閥件或管路一定要清洗干凈；

　　4.避免使用高粘度的溶劑作為流動相；

　　5.進樣樣品要全溶解；

　　6.大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2～7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍；

　　7.每天分析工作結束后，要清洗進樣閥中殘留的樣品；

　　8.每天分析測定結束后，都要用適當的溶劑來清洗柱；

　　9.若分析柱長期不使用，應用適當有機溶劑保存并封閉。