液相色譜柱應該怎樣清洗

1．高效液相色譜柱柱子的清洗

即使樣品和流動相已做過前處理，也仍難以完成避免柱子受到污染，因此必須對柱子行清洗。清洗應定期進行，如果在短期內分析許多樣品，則以每日清洗一次為宜，至少也應一周一次，防止有太多的雜質在柱上堆積。

反相柱的常規洗滌辦法是：分別取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱體積（既對于一根4.6mmX25cm的柱來說，通常是50-60ml，而對于9.4mm內經X50cm的柱來說，通常是500-600ml） ，使之通過柱子。然后用流動相平衡（通常仍用20倍柱體積），柱一般將恢復正常。如果選擇性仍和以前不一樣，則表明還有其他雜質留在柱子里，這時應考慮更加嚴格的清洗：先用20倍柱體積的水，再用相同體積0.05mol/L硫酸，最后用流動相溶劑。酸洗常能洗下有機溶劑所不能洗下的剩余雜質。在低pH值下做長期（一天或更長）清洗是不適宜的，但50ml洗液以2ml/min的速度清洗25min，一般對健合相沒有損害。注意，強堿不能用來清洗任何微粒硅膠柱（不論是健合相還是非健合相），因為硅膠骨架會溶解。對于嚴重污染的反相柱，只能采用再生的方法。

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2．高效液相色譜柱柱頭空隙的處理

拆下不銹鋼燒結過濾器后，檢查柱床，常可見柱頭塌陷，此時先剔掉無規則床層和帶色填料，使柱床呈白色并完全水平，再使甲醇作糊狀填料勻漿液，將填料勻漿液滴在柱上靠重力從勻漿液中排出甲醇液，重復數次，直到水平，完成了柱的再生。此時，如果柱頭孔隙深度小于1cm，可以采用下述局部重裝的辦法，否則，柱應當完全重裝或更換。