液相色譜法檢測某些中藥制劑中的格列本脲

　　摘要：建立液相色譜-電噴霧離子阱質譜聯用法鑒定純中藥降糖藥物中非法摻人的化學降糖藥格列本脲。方法：選用ZorbaxEclipseXDB-C8柱，以乙腈-水-甲酸為活動相，根據所檢測到化合物的色譜保存時間及多級質譜信息，并與對照品比較，對中藥制劑中非法摻進的化學降糖藥進行定性鑒別。

　　近年來中藥制劑的發展比較迅速，但在純中藥制劑中添加化學藥，嚴重違反了國家法規，威脅患者的健康。如治療男性性功能障礙的“純中藥”中加進“西地那非”;在減肥藥中加進西布曲明或能導致人出現甲亢癥狀的甲狀腺激素等。因此必須建立快速、靈敏、可靠的分析檢測方法，為純中藥制劑驗明正身。液相色譜-質譜聯用。

　　2.3格列本脲標準溶液的配制精密稱取一定量的對照品置容量瓶中加人活動相溶解并稀釋至刻度，使濃度為400μg/mL。

　　2.4受試溶液的配制取不同批號的被試膠囊各10粒，取出內容物分別混勻，將相當于1粒膠囊內容物重量的樣品分別置10mL具塞玻璃試管中，加進3mL甲醇，渦流2min，超聲20min，離心10min，取上清液用于分析測定。

　　3實驗結果

　　3.1格列本脲的色譜和質譜行為采用正離子檢測方式對格列本脲對照品進行LC/MS分析，其保存時間為6.4min;多級質譜分析結果，在一級全掃描質譜分析中產生的準分子離子[M H]峰為m/z494，[M Na]峰為m/z516，[2M H]峰為m/z987，[2M Ma]峰為m/zlO09，在二級全掃描質譜分析中，分子中胍基左側的酰胺鍵斷裂產

　　生m/z369的碎片離子，進一步對m/z369進行三級全掃描質譜分析，主要產生左側酰胺鍵斷裂天生的碎片離子m/z169，總結其裂解途徑，為實際樣品中化合物的鑒定提供了可靠的依據。

　　3.2待測樣品的檢測結果在相同的色譜及質譜條件下對6種純中藥制劑的甲醇提取液進行LC/MS分析，均檢測到色譜行為與格列本脲對照品相同的化合物，而且在相應的一級全掃描質譜分析中檢測到與格列本脲相同的準分子離子m/z494;為進一步確定所檢測到化合物的結構，對其進行多級質譜分析，該化合物的二級及三級全掃描質譜與格列本脲對照品完全相同，由此可以證實在6種被試中藥降糖藥物中所檢測到的化合物為化學藥格列本脲。

　　4討論

　　文獻中對格列本脲的檢測方法有紫外檢測法、熒光檢測法和質譜檢測法。中藥制劑中通常都含有多種中藥材，每種藥材中均含有多種組分，采用紫外檢測法或熒光檢測法對中藥提取液進行檢測時，由于選擇性不強，在干擾組分多的情況下，對待測物的色譜分離提出了更高的要求，因此可能會產生假陽性結果。本文采用LC/MS技術，將高效液相色譜的高分離能力與質譜分析的高選擇性相結合，對純中藥制劑中非法摻進的化學降糖藥格列本脲進行多級質譜分析，對其進行了結構確證，增強了檢測結果的可信度。該法靈敏度高，選擇性強，對該中藥制劑的質量控制具有現實意義。