在液相色譜分析中由于使用了微粒固定相及高壓流動相,樣品以柱塞式注入色譜柱后,因柱的阻力大,樣品分子在柱中的分子擴散很小,直至它從色譜柱流出也未與色譜柱內壁接觸,因而引起的色譜峰形擴展很小,能保持高柱效。此現象常稱為“無限直徑效應”。
在液相色譜儀中如何保持柱塞式進樣是一個重要的操作,進樣時應將樣品定量地瞬間注入色譜柱的上端填料中心,形成集中的一點。常用的進樣器主要有以下幾種:
1 停流進樣裝置
用HPLC專用注射器抽取一定量的樣品,經橡膠進樣隔墊注入到色譜柱頭。對使用水-醇體系做流動相的反相色 譜可使用硅橡膠隔墊。對使用多種有機溶劑的正相色譜應使用亞硝基氟橡膠隔墊。當色譜柱操作壓力超過15MPa時,帶壓操作會引起流動相泄漏,為此可采用停流進樣技術。

2 六通閥進樣裝置
使用耐高壓、低死體積的六通閥進樣,其原理與氣相色譜中的氣體樣品的六通閥進樣完全相似。此閥的閥體用不銹鋼材料,旋轉密封部分由堅硬的合金陶瓷材料制成,既耐磨、密封性能又好。
3 自動進樣器
自動進樣器是由計算機自動控制制定了閥,按預先編制注射樣品的操作程序公正。取樣、進樣、復位、樣品管路清洗和樣品盤的轉動,全部按預定程序自動進行,一次可進行幾十個或上百個樣品的分析。自動進樣的樣品量可連續調節,進樣重復性高,適合作大量樣品分析,節省人力,可實現自動化操作。
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