流動相溶劑的選擇:正確選擇流動相溶劑對高效液相色譜的成功至關重要。
目前還沒有理想的選擇模式這主要取決于經驗的積累。
流動相溶劑選擇的一般要求是:
(1)溶劑應純度高,不溶于固定相,并能保持色譜柱的穩定性;
(2)溶劑的性能應與所用的檢測器相匹配;
(3)溶劑應具有足夠的樣品溶解能力;
(4)溶劑應該具有低粘度和合適的低沸點;
(5)盡量避免使用毒性明顯的溶劑。
在選擇流動相溶劑時可以考慮影響分離度R的因素即柱效率分離系數A和容量系數選擇溶劑時,首先是一些物理性質(如沸點、粘度、紫外吸收等)的溶劑。)不適合在液相色譜中使用,然后應選擇能夠保持分析樣品中組分的體積因子值在1至10之間并具有適當洗脫強度的溶劑。對于多組分樣品,該值可以在0.5和20之間擴展。在具有合適值的溶劑中,應進一步選擇能夠分離樣品中不同組分并使每個相鄰組分的分離因子α大于1.05的溶劑。為Ic和A選擇的溶劑還必須與能夠提供高理論塔板數的色譜柱結合。因此,作為色譜工作者,熟悉表征溶劑物理化學性質的重要參數,如溶劑強度參數、溶解度參數δ、極性參數P、粘度η等。,將在液相色譜流動相溶劑的選擇中發揮非常重要的作用。
有100多種溶劑可以用作液相色譜的流動相,但只有少數是實用的溶劑該實驗室采用甲醇,乙腈水,四氫苯、正己烷、二氯甲烷,解決了9%以上的色譜分離問題。
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