液質聯用&氣質聯用高手進階，輕松解決各種問題（一）

質譜具有很高的靈敏度和分辨率，在定性和定量方面有很有優勢，所以現在配置質譜的實驗室越來越多，質譜相對色譜來說，除了對環境的要求更高，操作和維護也更加繁瑣，每個品牌不同系列的維護要求也不同，但質譜儀有些基本的維護操作，本文就總結下質譜儀日常需要做到的維護，基本適用大部分的液質聯用儀。

質譜儀工作環境

質譜儀環境要求:

①周圍無強烈震蕩源及電磁感應裝置;

②電源要求接地交流電;

③室溫要求15～28℃;

④相對濕度要求20%～80%。

可見使用過程中要特別注意室內溫度和濕度的控制。一般沒有外置飛行管的飛行時間質譜對環境的要求更嚴格，外部環境會直接影響質量軸的準確性。質譜儀采用兩級抽氣結構，前級為機械泵，后級為分子渦輪泵工作時先由前級泵，將真空腔內的壓強降低幾個數量級，再由后級泵降至工作所需壓強。

液質原理、分類、特點

LC-MS原理概述

液質聯用以液相色譜作為分離系統，質譜為檢測系統。樣品在質譜部分和流動相分離，被離子化后， 經質譜的質量分析器將離子碎片按荷質比分開，經檢測器得到質譜圖。

體現了色譜和質譜優勢的互補，將色譜對復雜樣品的高分離能力，與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質量與結構信息的優點結合起來，在藥物分析、食品分析和環境分析等許多領域得到了廣泛的應用。

常用的兩大分類系統：

一種是從質譜的離子源角度來劃分，包括電噴霧離子源(ESI)，大氣壓化學電離源(APCI)，大氣壓光電離源(APPI)和基質輔助激光解吸電離源(MALDI)等。

另一種是從質譜的質量分析器角度來劃分，包括四極桿、離子阱、飛行時間(TOF)和傅立葉變換質譜等。ESI、APCI和APPI三種離子源大多與四極桿和離子阱質譜聯用，是目前應用最廣泛的幾種液質聯用儀。

主要分析特點：

LC-MS除了可以分析氣質聯用所不能分析的強極性、難揮發、熱不穩定性的化合物之外，還具有以下幾個方面的優點：

分析范圍廣，MS幾乎可以檢測所有的化合物，比較容易地解決了分析熱不穩定化合物的難題;

分離能力強，即使被分析混合物在色譜上沒有完全分離開，但通過MS的特征離子質量色譜圖也能分別給出它們各自的色譜圖來進行定性定量;

定性分析結果可靠，可以同時給出每一個組分的分子量和豐富的結構信息;

檢測限低，MS具備高靈敏度，通過選擇離子(SIM)檢測方式，其檢測能力還可以提高一個數量級以上;

分析時間快，LC-MS使用的液相色譜柱為窄徑柱，縮短了分析時間，提高了分離效果;

自動化程度高，LC-MS具有高度的自動化。

使用

一、開機：

質譜儀的開機首先開氣，再開機械泵，再打開質譜儀的電源，等真空度達到后再開啟分子渦輪泵，等真空度達到后才可以進行調諧校正，一般至少需要抽12個小時才能達到。每次開機后都需要校正后才能使用質譜儀。

二、樣品測試過程：

1、與液相色譜聯用時，流動相需要先用<0.45μm的膜過濾，需要區別有機膜和水膜，樣品也同樣需要過濾或者用>10000rpm的轉速離心去掉固體雜質。

2、流動相不能用難揮發的酸或鹽，如磷酸鹽和硼酸鹽，液相常用的TFA會抑制離子電離，也不建議使用;表面活性劑在質譜中響應很高，尤其是ESI源，所以所有管和器具的清洗不能用洗潔精，用來改善分離和色譜峰形的離子對試劑也應慎用。與質譜聯用時建議使用的是甲酸、乙酸、甲酸銨、乙酸銨和氨水等。

3、根據選用的離子源調整液相方法，ESI源一般用0.3~0.6mL/min,常規HPLC分析柱的規格是5μm，4.6×250mm的，一般流速都是1mL/min，可以采用柱后分流的方式來調整進入質譜的流量。同時要根據進入質譜的流量和樣品性質調整霧化氣溫度和霧化氣的流量。

4、樣品測試結束后，需要清洗進樣管路，清洗后停泵，待離子源溫度降低后再選擇待機狀態。

液質日常定期維護

1、使用的穩壓電源UPS，保證儀器電源電壓穩定持續(特別是停電時對儀器的影響)。

2、每天用異丙醇溶液沖洗系統和清潔霧化室，定期開震氣閥震氣(對于ESI源，至少每星期做一次;對于APCI源，每天做一次)，保證毛細管潔凈。

3、流動相流速不要過高，ESI離子源不要超過0.5ml/min，APCI不要超過1.0ml/min。

4、機械泵的泵油需要定期更換，一般半年更換一次，如果泵油看起來很臟，需要提前更換。更換泵油的時候需要將泵油全部倒出，再更換新的泵油，不同品牌的泵油不能混用。一般實驗室的質譜儀都會在長假的時候進行大的維護。

5、控制好樣品運行的環境，包括溫度和濕度。

6、實驗完畢后要清洗進樣針、進樣閥等，用過含酸的流動相后，色譜柱和離子源都要用甲醇/水沖洗。

7、定期清洗樣品錐孔，關閉隔斷閥，取下樣品錐孔，先用甲醇：水：甲酸(45：45：10)的溶液超聲清洗10分鐘，然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10分鐘，待晾干后再安裝到儀器上。

8、流動相要現用現配，最好不要過夜，一定要新鮮。

9、定期更換電子倍增器。