實驗方法原理 AST 催化門冬氨酸與α-酮戊二酸的氨基轉換反應，生成草酰乙酸和谷氨酸。
L-門冬氨酸十α酮戊二酸 ＝ 草酸乙酸十L-谷氨酸
經 60min反應后，加入2,4 二硝基苯肼終止反應，并與反應液中的二種α-酮酸生成相應的2,4二硝基苯腙，在堿性條件下，兩種苯腙的吸收光譜曲線有差別，在500－520nm處差異最大，草酸乙酸所生成的苯腙的顯色強度顯著大于α-酮戊二酸本腙，據此可用比色法測定AST活力。
實驗步驟
一、 實驗試劑：
l. 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，PH7.4
2. 1mmol／L 2，4二硝基苯肼溶液
3. 0.4mol/L氫氧化鈉溶液
4. 2mmol/L 丙酮酸標準液
5. AST底物溶液（DL-門冬氨酸200mmol/L. α-酮戊二酸2mmol/L）：稱取α-酮戊二酸29.2mg和DL-門冬氨酸2.66g，置于一小燒杯中，加人lmol/L氫氧化鈉溶液1.5ml，溶解后加0.lmol/L磷酸鹽緩沖液80ml，用lmol/L氫氧化鈉調至PH7.4，然后將溶液移人100ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖浪稀釋至刻度放置冰箱保存。
二、 實驗操作：
各管混勻后，置37℃水浴箱保溫20min，然后每管加入0.4mol/L氫氧化鈉溶液5ml，室溫放置5min，用分光光度計在波長505nm處以蒸餾水調零點，讀取各管吸光度，測定管吸光度減去樣本對照管吸光度，從標準曲線套得AST活動單位。
標準曲線繪制：
參考值：8-28卡門單位。
注意事項
l. 本法的缺點是標本AST活性高時草酰乙酸對AST現實反鎖抑制，使測定結果偏低，酮血癥中乙酰乙酸及β-羥基丁酸，因沒對照管不會引起測定結果假性偏高。
2. 若用L-門冬氨酸稱量為1.33g。
3. 等血清酶活力超過15O卡門單位時，應將血清用生理鹽水稀釋5倍或10倍后再進行測定。
4. 底物中的α-酮戊二酸和2,4-二硝基苯肼為顯色物質，稱量必須準確，每批試劑的空白管吸光度上下波動范圍不應超過0.015A，如超出范圍應檢查試劑和儀器方面問題。