【關鍵詞】:溶血 生化檢驗 采血
溶血,是指紅細胞破壞,血紅蛋白溢出細胞外。常見于人為因素如不規范采血,或由于保存血液及運送分離過程中引起血細胞破裂,另一種是體內溶血,如溶血性貧血等。由于生化檢測多采用分光光度法,因此溶血標本使細胞內容物混入血清,干擾光譜波長,一定程度下影響生化檢測結果,不利于臨床醫生診斷。由此可見了解溶血現象對于檢驗項目的影響具有重要的意義
1、標本與方法:
1.1、制取標本:抽取我院50名體檢者5ml靜脈血液,分別置于兩排試管中,每支試管2.5ml,其中一排試管采取人工方法使其溶血并貼置標簽作對照組。
詢問體檢者有無既往病史,是否至少空腹8小時采血等,排除一切影響因素。
兩排試管室溫下放置30min后以3000r/min速度離心,10min后分離血清。正常血清無肉眼可見的黃疸,溶血,脂血現象。若對照組血清為淡紅色,則標本溶血。
1.2、操作方法:采用長征復星CS-800生化分析儀,試劑由上海復星長征醫學科學有限公司提供。標本檢測前對生化分析儀做室間質控,檢測每項試劑是否合格,如發現失控(在+-2SD范圍外)應及時校正。按照儀器操作規程,分別對ALT、AST、GLU、TG、BUN、Cr、UA、CK、CK-MB、LDH、K + 等11項生化項目進行檢測與比較。每份溶血血清和正常血清分別測定10次,標本各指標取均值,將正常標本均值與溶血均值對比觀察。
統計學方法:數據采用SPSS11.0統計軟件處理,均數±標準差表示計數資料,t檢驗表示組間計量資料,方差檢驗表示計數資料比較,有統計學意義的范疇為P<0.05。
2、結果
經測定后溶血標本中GLU略低于正常血清,ALT、BUN、Cr、UA、TG結果檢測較正常血清有輕微變化,差異無顯著性(P>0.05)。K+ 、AST、CK、CK-MB、LDH測定結果明顯高于未溶血標本,差異非常顯著性(P<0.001)。溶血血清與正常血清生化測定對比觀察結果見表1。
表1 標本未溶血、輕度溶血、重度溶血狀況下測得的結果均值 | ||||
項目 | 溶血前(均值) | 溶血后(均值) | 結果 | |
ALT | 21.4 | 22.1 | ↓ | |
AST | 27.6 | 42.8 | ↑ | |
GLU | 5.62 | 5.37 | ↓ | |
TG | 2.27 | 2.33 | ↑ | |
BUN | 4.9 | 5.3 | ↑ | |
Cr | 65 | 72 | ↑ | |
UA | 275 | 283 | ↑ | |
CK | 68 | 183 | ↑ | |
CK-MB | 19 | 37 | ↑ | |
LDH | 118 | 352 | ↑ | |
K+ | 3.9 | 5.1 | ↑ |
注:ALT、AST、CK、CK-MB、LDH單位為U/L, GLU、TG、BUN、K+單位為mmol/L,UA、Cr單位為umol/l
3、分析
AST、CK、CK-MB、LDH等心肌酶均屬于細胞內酶,細胞內濃度遠高于細胞外濃度,其中AST在紅細胞中的活性是血漿的38倍,LDH胞內濃度為胞外3000倍,輕度溶血即帶來顯著影響,因此溶血標本不適用于心肌酶檢測。K+胞內外濃度差約30倍,溶血對K+影響也較明顯,電解質其他項目如Na+、Cl-因細胞外濃度遠大于胞內濃度,影響甚微。蛋白類,甘油三酯,尿素,尿酸,肌酐影響則不明顯。另外,因溶血導致LDH清濃度升高,直接影響糖酵解,進而使血糖濃度偏低。
4、討論
溶血對標本影響機理分析
1、試劑多采用速率法,溶血使血紅蛋白從紅細胞中釋放,通過非特異性吸附,影響過氧化物酶,從而引起測量誤差。
2、細胞溶血使細胞內液釋放出來,稀釋待測酶濃度,帶來輕微誤差。
3、腺苷酸酶從紅細胞中釋放出來之后,所有的ATP肌酸類酸轉化酶幾乎都受到影響,這屬于紅細胞內外液之間的反應。
4、細胞內容物如脫氫酶一定程度上干擾其他酶生化反應。
原因及對策
溶血原因:溶血主要分為體內溶血和體外溶血。體內溶血分物理因素(如大血管手術),生物因素(惡性瘧疾),藥物毒性反應、配血不合引起的輸血反應等因素。體外溶血又分為物理因素(如機械性破壞、冰凍)、化學因素(如血樣接觸活性劑)、代謝性因素(如遺傳性疾病引起的紅細胞脆性增加)。較為常見的有采血帶帶捆綁過久,采血不慎刺穿靜脈導致采血過程不順,注射器抽吸過猛導致氣泡生成等。
因此,采血要求規范化操作,最大限度避免溶血現象發生。臨床上,為對于工作人員須做到以下幾點