溶血性是鑒定球菌最常用的項目，也是鑒定過程中重要的一步。1919年Brown對溶血性進行了描述。
α溶血：或稱甲型溶血，在血平板上，菌落周圍部分紅細胞被破壞，呈現一個草綠色環。
β溶血：或稱乙型溶血，在血平板上，菌落周圍紅細胞完全溶解，呈現一個清楚透明溶血環。
γ溶血：或稱丙型溶血，血平板上，菌落周圍無紅細胞溶解，因而無溶血環。
溶血性的識別可在血平板表面菌落周圍和穿刺處通過肉眼觀察，也可用顯微鏡觀察。除在分離血平板上觀察菌落周圍的溶血性外，還可用以下方法確認。
材料：羊血平板。
方法：將標本接種于羊血平板上，用接種針在已接種過的血平板上扎2～3處，使細菌被接種到瓊脂層深處，35℃孵育過夜。
觀察結果：在接種針穿刺過處，羊紅細胞完全溶解，形成無色透明區，為β溶血。羊紅細胞部分溶解或不溶解呈草綠色的環，為α溶血。不溶解無溶血環為γ溶血。