將SRBC免疫的小鼠脾臟(或家兔淋巴結)制成單個細胞懸液,與SRBC在瓊脂糖凝膠內混合后傾注于小平皿或玻片上。脾細胞中的抗體生成細胞,釋放抗SRBC抗體,使其周圍的SRBC致敏,在補體參與下可將SRBC溶解,形成肉眼可見的溶血空斑。每一個空斑中央含一個抗體形成細胞,空斑數目即為抗體形成細胞數。空斑大小表示抗體形成細胞產生抗體的多少。