① 樣品
動態光散射（DLS）的測量原理是基于粒子的布朗運動。這就限制了可以使用該方法測量的樣品的范圍。
動態光散射可以測量膠體，如：
——分散在溶劑中的固體粒子、聚合物、蛋白質……
——乳液
但是，動態光散射方法不能測量：
——干粉（可以在溶劑中均勻分散后進行測量）
② 溶劑
可供DLS測量的樣品在一般情況下應該是分散在液相中的。如果是在一個研究實驗室中準備樣品，在生產或合成并經過純化后，在大多數情況下，樣品應該已經處于一種分散的形式。如果待測樣品是干燥的（粉末），在測量之前比如加入溶劑。最常見的溶劑包括：
——去離子水或超純水；
——甲苯；
——甲醇；
——乙醇；
——甘油……
在選擇溶劑時，有兩個要素應當考慮。首先，溶劑應該讓顆粒分散良好。在某些情況下可能需要使用分散劑，如位阻或離子表面活性劑。確保所選的溶劑，與分散劑一起，在DLS測試整個測試過程中，提供足夠的膠體穩定性。其次，溶劑應該不改變樣品的性質，比如溶劑應該不溶解顆粒。
如果有多個溶劑能夠滿足上述兩個條件，那么應該選擇讓樣品產生最大折光指數增量的溶劑。樣品濃度給定，樣品和溶劑的折光指數差值最大，那么所產生的信號最強。如果樣品不能濃縮，且信號弱到不足以保證可靠的測量，用戶需要更換功率更高的激光。
需要確保所使用的溶劑純度足夠高，且不包含大分子量的雜質，比如灰塵。如果粒子小，散射很弱，去除大分子量雜質是非常必要的，因為這些雜質的信號甚至會屏蔽掉待測粒子的信號。大摩爾質量的成分可以選擇合適的濾器通過多重過濾的方法去除。如果可能的話，請選用0.1μm孔徑的濾膜。其他的方法還包括蒸餾和離心。在使用之前，瓶子和容器也需要使用高純度溶劑進行沖洗。
對于懸浮液樣品，可能會采取過濾的方法去除那些“不受歡迎”的大分子量成分。但是在這種情況下，有效的待測組分也可能會被濾除，這就意味著樣品的整體性質可能會發生改變。選擇具有適當孔徑的過濾器，確保待測粒子不會被濾掉。需要注意的是，在過濾過程中，由于粒子可能被濾膜吸附，樣品的濃度可能會發生改變。排除雜質的另外一種選擇是讓他們沉積或者“溫和”離心。
一個優秀的實驗室會提供非常干凈的工作環境（最好是潔凈室、層流罩或者通風良好的通風櫥）。將溶劑、移液管、小瓶和樣品密封，來最大程度的降低被灰塵污染的風險。另外，帶手套是值得鼓勵的，這不僅可以降低樣品污染的風險，還能保證安全。至于樣品濃度，濃度越低，受大分子量雜質影響會越大。
③ 濃度
待測樣品的濃度主要取決于具體所采用的DLS技術。濃度過高的樣品需使用相同的溶劑進行稀釋，過稀的樣品則可以通過離心、去除溶劑和隨后再分散的方法進行濃縮。
傳統的DLS是在標準的2D模式下進行測試的，需要高度稀釋的懸浮液，這是為了避免多重散射效應，此外還為了減少顆粒間的相互作用，這都會使DLS測試數據無效。濃度過高，會導致流體動力學半徑測量的系統誤差。但另一方面，樣品過稀，可能導致信號過弱。從視覺效果來看，比較理想的懸浮液是透明的或微弱的乳光。比較好的辦法是配置幾個不同濃度的樣品進行測試，來確定最佳濃度。
通常，1-10mg/mL范圍之間的濃度是比較適當的樣品濃度的起點。流體力學半徑對濃度作圖，最佳的濃度顯示在“高位”流體力學半徑所對應的區間。濃度過高，流體力學半徑會被“低估”。換而言之，如果不同濃度的樣品提供不同的測試結果，則意味著樣品需要進一步稀釋。但是，濃度過低的樣品得到的結果性噪比會非常差。
在三維測量模式下，由于多重散射信號被抑制，高濃度（透明、幾乎乳白色）的樣品可以被直接測量。但是需要指出的是，盡管三維光散射技術提高了測試濃度的上限，但是卻犧牲了一定的“信噪比”，這意味著，盡管沒有系統誤差，但是非常濃的樣品實際上可能也無法測定，在這種情況下，調制三維互相關技術是更好的選擇，因為它極大的提高了性噪比，大大拓展了測試濃度范圍。
④ 均勻
待測樣品應該足夠分散，且懸浮液是均勻的。我們可以通過超聲波（最高功率15分鐘）來處理，對于比較脆弱的樣品，可以通過吸管多次重懸。
如果粒子帶電，大范圍的靜電雙電層作用會開始起到作用。加入少量的鹽或者通過鹽溶液進行稀釋可以抑制這種相互作用，同時還能保持樣品的穩定性。通常能有效屏蔽電荷作用的鹽濃度在0.1mM到10mM之間。鹽的選擇，一般取決于所使用的溶劑：
——水溶液：溴化鉀、溴化鈉、氯化鈉、硝酸鉀；
——非鹵化溶劑（THF、DMF、DMA）：溴化鋰；
——鹵化溶劑（氯仿、二氯甲烷、鄰二氯苯）：NBut4Br……
⑤ 樣品瓶
請確保測量用的樣品瓶是清潔無塵的。可以使用丙酮浴樣品瓶清洗器來清洗它們。為了快速干燥，可以采用真空環境下60℃的烘箱烘烤或者氮氣吹掃方法。在這種情況下，樣品瓶需保持倒置以避免任何污染。
將懸浮液倒入瓶中的時候，需確保沒有氣泡產生。如果有氣泡產生，可以采用超聲處理或者用吸管重懸。為了避免氣泡產生，一個比較好的辦法是“杯壁下流”。
樣品瓶中的樣品量也需要“優化”。樣品太少，激光不會穿過樣品，而樣品太多，樣品瓶中的一部分樣品將露在適配液液面（適配液為甲苯或十氫萘）之上，而樣品的溫控是通過適配液“油浴”提供的，這樣將會導致溫度梯度，形成的溶劑對流運動會影響顆粒的布朗運動。
根據不同的儀器配置，可以使用不同規格的樣品瓶。通常光散射儀都使用圓柱形的樣品瓶，而三維光散射儀在某些特殊情況下會使用方形樣品瓶。
不要再樣品瓶上做標記（即樣品瓶上不能有墨水），墨水能在適配液中溶解，污染循環水浴，這將改變適配液的光學性質并影響測量。
當使用NanoLab 3D三維粒度儀進行測量時，有三種規格的方形樣品瓶可選（3×3毫米，5×5毫米以及10×10毫米）。此外，在某些不能使用玻璃樣品瓶的情況下，可以使用一次性塑料樣品瓶（10×10mm）作為替代。由于NanoLab采用半導體控溫，所以，樣品瓶上可以做標記，但僅限于光不通過的瓶壁。
在把樣品瓶插入儀器測試之前，需要用紙再一次清潔樣品瓶，請使用實驗室玻璃器皿清潔專用的低纖維、無磨砂紙張。不要再試管表面留下指紋，并確保試管外壁干燥。
⑥ 平衡
將樣品瓶插入樣品瓶支架后，需等待10-15分鐘，使樣品的溫度和熱浴相同。
現在，樣品準備好了。接下來，選擇測試參數，測量并進行數據分析。