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  • 發布時間:2019-04-07 15:32 原文鏈接: 火箭電泳實驗

    實驗方法原理在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。
    實驗材料

    待檢血清

    試劑、試劑盒

    巴比妥緩沖液瓊脂粉

    儀器、耗材

    微量進樣器打孔器玻璃板電泳儀

    實驗步驟

    1.  抗體瓊脂板的制備:同單向擴散法,但注意稀釋液應用pH8.6離子強度0.05 M 的巴比妥緩沖液。


    2.  打孔見下圖

    圖1 火箭電泳抗原孔位置圖

    3.  將用緩沖液稀釋的適宜濃度的參考血清及適當稀釋的抗原(人血清)分別加入各孔中,每孔10或20微升,要求加量準確而不外溢。


    4.  把加完樣的免疫瓊脂板放入電泳槽中進行電泳,電壓4~6伏/厘米,電泳時間1~5小時,直到大部分抗原孔前端出現頂端尖窄而完全閉合的火箭狀沉淀線,關閉電源。


    5.  取下瓊脂板,以抗原孔中心為起點,量出各火箭狀沉淀線的高度。同單向瓊脂擴散法繪制標準曲線,查出待檢血清中Ig含量。

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