1、涂片鏡檢
病料涂片以堿性美藍、瑞氏染色或姬姆薩染色法染色鏡檢，如發現有典型的炭疽桿菌，即可作出初步診斷，材料不新鮮時菌體易消失。
2、分離培養
取病料接種于普通瓊脂或血液瓊脂，37℃培養18~24h，觀察有無典型的炭疽桿菌菌落，同時涂片作革蘭染色鏡檢。
3、動物感染試驗
將被檢病料或培養物用生理鹽水制成1：5乳懸液，皮下注射小鼠0.1mL或豚鼠、家兔0.2~0.3mL。動物通常于注射后24~36h（小鼠）或2~3d（豚鼠、家兔）死于敗血癥，剖檢可見注射部位皮下呈膠樣浸潤及脾臟腫大等病理變化。取血液、臟器涂片鏡檢，當發現竹節狀有莢膜的大腸桿菌時，即可診斷。