煙草CuZnSOD同工酶的分離純化與鑒定

摘要: 利用硫酸銨鹽析分級分離、乙醇- 氯仿沉淀除雜、丙酮再沉淀分級得到含銅鋅超氧化物歧化酶(CuZnSOD) 的粗酶液, 通過DEAE-52 離子交換層析實現了3 種CuZnSOD同工酶的拆分; 進一步通過G-75 凝膠層析對3 種同工酶分離純化得到2 種電泳純產品CuZnSOD Ⅰ和CuZnSOD Ⅲ; SDS- PAGE實驗發現CuZnSOD Ⅰ由兩個不等亞基組成, 亞基相對分子質量分別為15 050、20 950; CuZnSOD Ⅲ存在一種亞基, 亞基相對分子質量為22950; 實驗檢測到2 種純酶分子含有不等量的Cu 和Zn , 酶學特性實驗也證實了2 種蛋白酶都是CuZnSOD。