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  • 發布時間:2022-10-18 11:12 原文鏈接: 熱啟動PCR的原理應用優缺點

       1.熱啟動PCR概述:盡管Taq DNA聚合酶的最佳延伸溫度在72℃,聚

        合酶在室溫仍然有活性。因此,在進行PCR反應配制過程中,以及在熱循環剛開始,保溫溫度低于退火溫度時會產生非特異性的產物。

        熱啟動就是PCR儀達到變性溫度再加入Taq DNA聚合酶,從而抑制一種基本成分延遲DNA合成。

        2.熱啟動PCR應用:如site-directed突變、表達克隆或用于DNA工程的遺傳元件的構建和操作

        3.熱啟動PCR使用條件:好的引物設計

        4.熱啟動PCR優缺點:

        ⑴優點:提高PCR特異性最重要

        ⑵缺點:方法十分煩瑣,尤其是高通量應用。


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