熟牛肉中的五種人工合成色素的測定

衛生部近日匯總公布了《食品中可能違法添加的非食用物質和易濫用的食品添加劑品種名單》，上海月旭公司從公布的黑名單中統計發現，包括三聚氰胺、蘇丹紅、孔雀石綠、人工合成色素等都在內。針對這些令人觸目驚心的食品添加劑，同時也為食品安全檢查和監管工作提供有力的技術支持和保障，上海月旭公司迅速組織相關人員研制出了方便、快速、準確的檢測方法，現將熟牛肉中的五種人工合成色素的測定方法公布如下：

1. 適用范圍

適用于熟牛肉中的五種人工合成色素(檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃 、亮藍)的測定。

2. 提取

精確稱取2±0.2 g 粉碎后的熟牛肉，于50 mL聚丙烯離心管中，加入5 mL丙酮：水（90:10）混合溶液，渦動1min，均質1min（1000rpm），4000 rpm離心5 min，轉移上清液于50 mL離心管中，殘渣用5 mL丙酮：水（90:10）混合溶液重復提取兩次，合并上清液。上清液中加入10 mL石油醚（60-90℃），上下翻轉5次，4000rpm離心3min，除去石油醚層，下層于80 ℃氮吹至2 mL以下，加入定容至5 mL，混勻，待凈化。

3. 凈化

預處理：向Welchrom^? P-WAX（60mg/3mL）中加入3 mL甲醇、3 mL水，流出液棄去；

上樣：將上述提取液加入柱中，流出液棄去，用5 mL水涮洗樣品管，轉入SPE柱；
淋洗：3 mL甲醇、3 mL甲醇：甲酸（6：4）依次過柱、3 mL正己烷過柱，小柱真空干燥5 min；

洗脫： 3*1 mL 5%甲醇洗脫，收集；

重新溶解：80 ℃氮吹至干，1 mL水復溶，渦動30 s，過0.22μm濾膜，待分析；

4. 檢測

色譜條件：

色譜柱： Ultimate^? XB-C18 液相色譜柱（4.6 mm x 150 mm, 3 μm）

流動相：

A: 0.02mol/L乙酸銨水溶液（乙酸調節pH=4）

B: 甲醇

梯度洗脫程序見右圖

流速：0.7 mL/min

進樣量： 20 μL

柱溫： 40°C

檢測波長： 254 nm

運行時間：17 min

5. 附圖

1. 檸檬黃； 2.莧菜紅； 3.胭脂紅；4. 日落黃 ；5.亮藍

方法中使用到的耗材

1、 檸檬黃標準品：WEL-S-0001

莧菜紅標準品：WEL-S-0002

胭脂紅標準品：WEL-S-0003

日落黃標準品 ：WEL-S-0004

亮藍標準品：WEL-S-0005

2、 固相萃取小柱：Welchrom^? P-WAX（60mg/3mL，P/N：WSP050306）

3、 液相色譜柱：Ultimate? XB-C18,4.6 mm x 150 mm, 3 μm（Ult3B18415）

4、 13mm，孔徑0.22μm尼龍針孔濾膜（P/N: WEL-SFNY213022）

5、 12孔固相萃取裝置（WEL-Vac-12）