DPSCs的凍存
DPSCs凍存后復蘇
| 實驗方法原理 | |
|---|---|
| 實驗材料 | 牙髓組織 |
| 試劑、試劑盒 | 滅菌PBSA 用冰預冷的凍存液I 用冰預冷的凍存液II 胰蛋白酶-EDTA溶液：0.05%胰蛋白酶 0.54mmol L(0.2%)EDTA 無Ca2+和Mg2+的Hank’s平衡鹽溶液溶解 |
| 儀器、耗材 | 1.8mL凍存管 |
| 實驗步驟 |
(a)用PBSA洗培養瓶/皿三次。 (b)加足夠的胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育。 (c)在80%的貼壁細胞從培養表面脫離時，加人MSC培養基。 (d)500g離心6min。 (e)倒掉上清，用冰上預冷的凍存液I重懸細胞。 (f)細胞計數，然后稀釋或濃縮細胞到終濃度的2倍。繼續將裝有細胞的試管放置在冰上。 (g)在冰上邊轉動試管邊緩慢加人等體積的凍存液II。 (h)等量按份加人凍存管。 (i)將凍存管放入程控降溫儀。慢速冷凍盒和-80℃冰箱也可用于降低冷卻速度。將凍存管放人液氮長期儲存。
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