牛黃的含量測定

　　1.膽酸對照品溶液的制備

　　取在105℃干燥至恒重的膽酸對照品12.5mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加60%醋酸溶液溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml中含膽酸0.5mg）。

　　標準曲線的制備

　　精密量取對照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8與1.0ml，分別置具塞試管中，各管精密加入60%醋酸溶液使成 1ml，再分別精密加入新制的糠醛溶液（1→100）1ml，在冰浴中放置中5分鐘，加硫酸溶液（取硫酸50ml，加水65ml混合）13.0ml，混勻，在70℃水浴中加熱10分鐘，迅速移至冰浴中放2分鐘，以相應的試劑為空白，照分光光度法（附錄Ⅴ B），在605nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

　　測定法

　　取本品約0.1g，精密稱定，加60%醋酸溶液適量，充分攪拌，移入50ml量瓶中，殘渣再用60%醋酸溶液攪拌，全部移入量瓶中，并用60%醋酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液各1ml，分別置甲、乙兩個試管中。

　　于甲管中加新制的糠醛溶液1ml，乙管中加水1ml代替糠醛溶液作空白，照標準曲線的制備項下的方法自“在冰浴中放置5分鐘”起，依法測定吸收度。

　　從標準曲線上讀出供試品溶液中膽酸的含量，即得。

　　本品按干燥品計算，含膽酸不得少于7.0%。

　　2.膽紅素對照品溶液的制備

　　取紅膽素對照品約10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加氯仿溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml含膽紅素0.01mg）。

　　標準曲線的制備

　　精密量取對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，置具塞試管中，分別加乙醇稀釋至9ml，各精密加重氮化溶液（甲液取對氨基苯磺酸0.1g，加鹽酸1.5ml與水適量使成100ml；乙液：取亞硝酸鈉0.5g，加水使溶解成100ml，置冰箱內保存。

　　用時取甲液10ml 與乙液0.3ml，混勻）1ml，搖勻，于15～20℃暗處放置1小時，以相應的試劑為空白，照分光光度法（附錄Ⅴ B），在533nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

　　測定法

　　取本品細粉約10mg，精密稱定，置錐形瓶中，加氯仿和乙醇（7:3）的混合溶液60ml，鹽酸1滴，搖勻，置水浴上回流加熱約30分鐘，放冷，移至100ml棕色量瓶中。

　　容器用少量混合溶液洗滌，并入量瓶中，用上述混合溶液稀釋至刻度，搖勻。

　　精密量取上清液10ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻。

　　精密量取3ml，置具塞試管中，照標準曲線的制備項下的方法自“加乙醇稀釋至9ml”起，依法測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品溶液中膽紅素的含量，即得。

　　本品按干燥品計算，含膽紅素不得少于35.0%。