Saito等在加有LIF的培養基中對牛ICM進行培養，分離得到牛ES細胞并進行傳代。Sims等使用與一般ES細胞分離完全不同的低密度培養法，使用BRL(buffaloratliver)條件培養基并添加亞硒酸鈉、胰島素、運鐵蛋白和50mL/L胎牛血清，培養6d～10d，得到15個ES細胞系，將其作為核供體進行核移植得到659枚重構胚，卵裂率70%，囊胚率24%，將其中34枚胚胎移植27頭假孕母體，13頭妊娠，最后生出4頭犢牛。而SticeSL等報道，以牛ES細胞為核供體建立的重組胚在移植受體后雖然會出現妊娠現象，但妊娠時間不超過60天，主要是因為胎盤畸形發育，包括缺乏子葉以及子宮阜出血反應。若將重組胚與正常8-細胞胚嵌合，則該嵌合胚可發育至85天，胎兒同樣缺乏子葉，DNA分析證實50%的嵌合體胎兒組織來源于ES細胞。Ito等分析比較了牛體內和體外培養的桑椹胚分裂球和囊胚ICM分離ES細胞的效果，結果僅在囊胚組獲得了類ES細胞。Cibelli等由49枚7日齡牛胚胎ICM分離到27個ES細胞系，用注射法將β-半乳糖苷酶基因導入ES細胞，選擇轉染的ES細胞注入8-細胞～16-細胞牛胚，其中18枚胚胎移植7頭受體，妊娠5周后，得到12個胎兒。對胎兒進行檢測，6個胎兒分別在生殖腺或原始生殖細胞(PGCs)中檢測到標記基因，表明ES細胞參與生殖系嵌合。Cibelli等建立應用牛胎兒成纖維細胞核移植生產轉基因牛類ES細胞的方法，得到6頭嵌合體。Mitalipova等自致密桑椹胚分離牛ES細胞，最高一株ES細胞傳至150代，且表達SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4和c-kit受體。