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  • 發布時間:2020-08-10 16:37 原文鏈接: 特異性酯酶:氯乙酸ASD萘酚酯酶(NCE)染色實驗

    實驗方法原理 細胞內酯酶水解合成的底物萘酚酯(一種萘的衍生物)而釋放出萘酚,并迅速與重氮鹽偶聯結果在酶活性部位有明亮色彩的沉淀物出現.

    試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液六偶氮化新品紅蘇木素氨水洗液

    實驗步驟

    一、實驗試劑:


    (一)底物混合液


    (1)0.067mol/L  磷酸鹽緩沖液(PH7.6)


    (2)六偶氮化新品紅(hexoliaed  new   fuchsin)溶液(新鮮配制)


    ①溶解新品紅(new  fuchisn)1g于2mol/L鹽酸液25ml中,溶液可長期保存。


    ②40g/L亞硝酸鈉溶液,4℃保存,每周必須新鮮配制,使用前將等體積新品紅溶液和40g/L亞硝酸鈉溶液混合,反應1min此液好為六偶氮化新品紅


    ③氯乙酸萘酚AS-D液:取氯乙酸萘酚AS-D(naphthol AS-D hcloroacetate)5mg溶于N,N-二甲基酰胺N,N-dimeth for mamide)2.5ml中。


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