實驗方法原理 細胞內酯酶水解合成的底物萘酚酯(一種萘的衍生物)而釋放出萘酚,并迅速與重氮鹽偶聯結果在酶活性部位有明亮色彩的沉淀物出現.
試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液六偶氮化新品紅蘇木素氨水洗液
實驗步驟
一、實驗試劑:
(一)底物混合液
(1)0.067mol/L 磷酸鹽緩沖液(PH7.6)
(2)六偶氮化新品紅(hexoliaed new fuchsin)溶液(新鮮配制)
①溶解新品紅(new fuchisn)1g于2mol/L鹽酸液25ml中,溶液可長期保存。
②40g/L亞硝酸鈉溶液,4℃保存,每周必須新鮮配制,使用前將等體積新品紅溶液和40g/L亞硝酸鈉溶液混合,反應1min此液好為六偶氮化新品紅
③氯乙酸萘酚AS-D液:取氯乙酸萘酚AS-D(naphthol AS-D hcloroacetate)5mg溶于N,N-二甲基酰胺N,N-dimeth for mamide)2.5ml中。