一、孕婦及哺乳期婦女用藥：
（1）大鼠和小鼠使用5-氟尿嘧啶后可引起多趾癥、口蓋裂等畸形，故妊娠或可能妊娠的婦女不宜使用注射用左亞葉酸鈣與5-氟尿嘧啶進行聯合化療。
（2）在至少50倍人用劑量的大鼠和兔的生殖毒性研究中，無證據表明左亞葉酸鈣具有胚胎毒性。未開展針對妊娠婦女充分良好的對照臨床試驗。由于動物生殖毒性研究并不能完全預測藥物人體作用，所以妊娠期婦女只有在潛在獲益超過胎兒安全風險時方可使用注射用左亞葉酸鈣。
（3）哺乳期安全性未確立，故哺乳期婦女不宜使用注射用左亞葉酸鈣。
二、兒童用藥：低體重出生兒、新生兒、乳兒、幼兒或小兒的用藥安全性未確立，故不宜使用注射用左亞葉酸鈣。
三、老年用藥：高齡者及生理機能低下患者，容易出現骨髓抑制，消化道反應（劇烈的腹瀉和口腔內膜炎等），皮膚毒性和神經精神系統毒性，故要注意用藥量和用藥間隔期，慎重用藥。