用微載體細胞培養的主要問題是選擇合適類型的微載體和適宜的攪動速度。三種類型微載體都適宜各類細胞生長，目的在于如何獲得最大量的細胞。另外應注意的是微載體對蛋白有一定的吸附能力，它們吸附率分別是總蛋白的4.3 %、2.7 %、1.1 %。所以使用血清的量最好不低于10 %。
1. 微載體選擇
（1）先利用三種小量微載體做培養實驗，觀察細胞在一定時間內細胞的附著率和計算細胞數，以得到最大量細胞為佳。
（2）通常是繪出生長曲線以比較它們容納細胞量的大小、微載體的用量和攪動的速度等。以能完全懸浮在培養基內效果最好。
2. 水化和消毒
（1）微載體水化過程要用玻璃容器，如有可能使用“硅化”的玻璃容器更好。這是因微載體顆粒小且輕，細胞吸附到表面后難以洗脫下來。
（2）水化時，首先稱一定量的微載體放入容器中，按每克微載體加50~100 ml 的比例，加入無Ca2+和M2+的磷酸緩沖液（PBS），室溫下放置應不少于3 小時，并不時輕微攪動，然后再用新鮮PBS 洗一次（30~50 ml/g 干粉）。如用Ⅲ型微載體，在水化作用時，表面不易濕潤而易出現沉淀。因此加入PBS 后，加數滴吐溫80（2~3 滴/100 ml）。
（3）消毒方法可采用高壓蒸氣消毒（15 磅，15 分鐘）。亦可在水化后用70 ％酒精浸泡消毒，再用無菌的PBS 漂洗一二次。微載體在培養基內呈懸浮狀態時，才能有效地增加細胞附著面積，可用電磁攪動裝置使其懸浮。—般在250 ml 培養基中，微載體濃度為3 mg/ml 時，攪動速度每分鐘50～70 轉效果最好。
3. 傳代培養
（1）在連續進行微教體培養時，可以不必把細胞從微載體分離下來，可將帶有細胞的微載體和新的微載體混合進行培養細胞能移動到新微載上。如果進行其它實驗或需要分離細胞進行傳代培養時，和常規培養相同；先用EDTA+胰蛋白本酶溶液作用使細胞脫離微載體表面。一般來說，比從玻璃表面分離細胞困難些，所以要預先用不含血清的培養液或緩沖液沖洗培養物，同時調節消化液的pH（pH7.8~8.0）和作用溫度、時間。
（2）細胞脫離微載體后，可用自然沉降法，即在室溫下靜置 5 分鐘，微載體將先自沉在底部，細胞大部份仍在上清中，然后離心上清即可得到細胞。如果需要分離程度較高時，需用孔徑為100 微米的尼龍網或不銹鋼網過濾后，再離心濾過液，就可得到較純凈的細胞。
（3）在許多情況下，如進行顯微鏡觀察、切片染色、冷凍儲存等，可以使細胞脫離微載體，也可用帶有細胞的微載體進行。用微載體培養哺乳動物細胞時，能在短時間內得到大量的活細胞，如果條件合適，在一周時間內，可獲得比原來接種量多數十倍甚至近百倍的產量，并可節省培養基。 展 | 