①具有復制起始位點，能使插入的外源目的基因或DNA片段在宿主細胞內進行獨立并且穩定的自我復制；
②在DNA復制的非必需區具有多種限制酶的單一識別位點，能被各種限制酶所識別并插入外源DNA片段；
③具有用來篩選重組體DNA的選擇標記基因；
④序列較短，利于容納較長的外源DNA片段；
⑤具有較高的遺傳穩定性。為了滿足以上要求，通常選擇生物體天然存在的質粒和噬菌體或病毒DNA作為載體母本，對其進行必要的修飾和改造，構建出具有多種作用的載體DNA分子。
