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  • 發布時間:2021-03-17 15:26 原文鏈接: 瓊脂糖凝膠電泳,凝膠電泳條帶

      原理

      瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳最主要區別是:它兼有"分子篩"和"電泳"的雙重作用。

      瓊脂糖凝膠具有網格結構,電泳分子通過時會受到阻力,大分子物質在泳動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。

      如下圖所示↘

      蛋白質和核酸會根據pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此電泳移動速度不同,根據這個原理可將其分開。電泳緩沖液的pH在6~9之間,離子強度0.02~0.05為最適。常用1%的瓊脂糖作為電泳支持物。瓊脂糖凝膠約可區分相差100bp的DNA片段,其分辨率雖比聚丙烯酰胺凝膠低,但它制備容易,分離范圍廣。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb,利用脈沖電泳,可分離高達10^7bp的DNA片段。

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