雙波長的應用是為了消除樣品中對測定有干擾的物質的影響,而實際應用中選擇輔助波長主要用于消除脂血、溶血、黃疸的干擾。脂血樣品中的脂質吸收光譜從300～600ｎｍ均有吸收,呈逐漸下降的趨勢；溶血樣品中的血紅蛋白在350ｎｍ、400ｎｍ、540ｎｍ、580ｎｍ有4個吸收峰；黃疸樣品中的膽紅素在300～500ｎｍ均有吸收,在400～500ｎｍ之間有強吸收峰。由于脂血、溶血、黃疸樣品在較寬的波長范圍內有較強的吸收光譜存在,因而常常同測定波長有重疊,此時測得的吸光度包含待測物質的吸光度和干擾物質的吸光度,選用輔助波長可消除干擾物質的吸光度。在輔助波長選擇中,根據測定波長選擇輔助波長,要求干擾物質在測定波長同輔助波長有相同的吸光度。例如:鉬酸銨法測定無機磷,其測定波長為340ｎｍ,對于溶血樣品,血紅蛋白在340ｎｍ有較強吸收,其吸光度同380ｎｍ處吸光度相同,選用380ｎｍ作輔助波長,用340ｎｍ和380ｎｍ兩波長的吸光度之差測定無機磷,可消除溶血對測定的干擾。