三、測定時間的選擇:
對于終點分析,測定時間的選擇應充分考慮到干擾的問題。例如:溴甲酚綠法測定白蛋白選用一點終點分析法,白蛋白同溴甲酚綠反應快,在一分鐘內基本上反應完全,隨著反應時間的延長,α 球蛋白同溴甲酚綠反應形成干擾,因而溴甲酚綠法測定白蛋白,其測定時間應定于1分鐘。對于速率分析法,一般用于酶活力的測定,而酶活力的大小是用反應速度來表示
,因而要求在零級反應期內測定反應速率,此時的反應速率不受底物濃度的影響,僅同酶活力大小有關。因此,測定時間應選在零級反應期內。對于一種物質的測定,由于選擇試劑和分析方法不同,其測定時間也隨之變化,因而對于特定的試劑和分析方法,應先做出反應進程曲線,從曲線上選擇最佳的測定時間。
四、樣品量和試劑量的選擇:
對于不同的全自動生化分析儀,其測定所需的反應液總量不同。例如:荷蘭VITALABSELECTRA分析儀要求反應液總量不低于250μl;日立7150型分析儀要求在250~400μl之間;日立7170A型分析儀要求在180~380μl之間。而試劑廠商給出了樣品量和試劑量的最佳比例,根據比例同時縮小或增加用量,同時滿足最小的反應液總量。
五、校正點的設置:
對于多數項目的測定,其濃度同吸光度變化基本上成線性關系,選擇低、中、高三個校正點可獲得滿意的準確度。如果只設置一個校正點,盡量選擇一個中值校正點。對于有些物質,例如比濁法測定免疫球蛋白,其濃度同吸光度不成線性,因而需要盡可能多設置不同濃度的校正點。全自動生化分析儀的應用,提高了檢驗質量和速度,為臨床作出診斷、決定治療方案、判斷療效和預后提供了可靠依據,為了使用好全自動生化分析儀,最重要是恰當設置各種分析參數。隨著分析方法的提高及試劑的更新,分析參數也隨之變化。