定標就是要找出一個參考點，就是一個K值（或F值）。它是由儀器和試劑狀態確定下來的。當我們測定一個標本時，無論你是用手工的方法或全自動生化分析儀，測出來的值只是一個吸光度，這個吸光度對我們沒有什么意義，我們要把這個吸光度轉換成一個濃度或酶的活性。那就要乘上一個K值，計算并打印出來的結果對我們就有意義了。K值就是我們通過定標找出來的。一般上最低要求是有試劑空白與標準品，經過儀器測定出兩個吸光度：
K=(標準濃度-試劑空白)/（A標準-A試劑空白）
（試劑空白通常為0）
標準液的濃度我們是知道的，這兩個吸光度可以由儀器測出，這樣就得出了一個K值。無論什么樣的標本，用其吸光度乘以K值我們就得到的答案。因此K值具有非常決定性的意義，可以決定標本的準確性。