生化分析儀的定標方法

      定標方法分為線性和非線性，又分為單點和多點定標方式，單點定標用在線性定標當中，目前不推薦使用。其原理是利用去離子水作為校準品進行一次校準也就是一點，然后輸入K因數，這樣就會在坐標上形成一條以因數為斜率，以水點吸光度為起點的直線。由于因數都是試劑廠家給的參考因數，而操作者很少去自行驗證修改，所以此法做出來的結果往往線性不好。

      2點線性法：

      通過測定空白或第一標準品與標準品或第二標準品形成工作曲線。第一標準品一般選擇水點。

      多點線性法：通過測定空白或第一標準品與標準品或第二標準品到第六標準品，形成線性回歸工作曲線。

      對數Logit法（非線性）：用于隨濃度升高而吸光度收斂的工作曲線。定標點3－ 6個，第一點般為水點，其余為校準品。

     指數函數法（非線性）：用于隨濃度升高而吸光度出現離散的工作曲線定標點3 -6個第一點一般為水點，其余為校準品。

      樣條函數法（非線性法）： 將每一標準值點對點連接起來，形成一個曲線，將測定誤差也擬合到曲線中，此法優于折線法。定標點3‐6個，第一點一般為水點，其余為校準品。

      折線法（非線性法）：將每一標準值點對點連接起來，形成一個折線，定標點3- 6個，第一點一般為水點，其余為校準品。

     同功酶線性法：一種樣本有兩種不同的同功酶，如果含有抑制劑的試劑不能完全單獨抑制一種同功酶，此時測定總活性和剩余活性可以計算出同功酶的活

性。使用兩個通道分別計算總酶活性和同功酶活性曲線。如果另種同功酶中指定一種同功酶的活性可以被單克隆抗體完全抑制的話，就沒有必要選擇這種方式。

      定標原理：使用兩個通道，數字較小的通道（同功酶P），先用一種試劑測定總的活性CF。在另一個通道，用含有抑制同功酶M或同功酶N的抑制劑的試劑測定同功酶M的活性CM或者同功酶N的活性CN。一般來說，此時同功酶N的抑制劑不能完全抑制同功酶N的活性，卻一定程度上抑制了同功酶M的活性。在此同功酶法中，兩個通道分別測定總活性及同功酶M、N的標準品活性。通常將總活性通道測得的K系數用于兩個通道。M和N的剩余活性通過兩個通道的第3、4標準品吸光度比率得到。利用這些數據計算出酶的總活性和同功酶M的活性，同功酶N的活性則通過項目間的計算獲得。

     定標的修正：

     量程定標：只使用試劑空白液以外的標準液1點進行定標目的修正以前工作曲線的斜率。

     兩點定標：使用試劑空白液和標準液1點進行定標目的修正前次工作曲線的S1ABS和斜率。

     全點定標：對指定的所有標準液全部使用的方，在定后所有參數被更新。

       校準時的檢查：定標結果的正確與否直接影響測試結果的準確，因此，有很多方法來驗證每一校準品的準確性，并提供報警信息給操作者提示。根據廠家的不同，方法和稱謂有所不同，大致的檢查方法如下：

      第一標準液允許吸光度的檢查；

      偏差允許偏差吸光度的檢查；

      靈敏度檢查；

      K系數檢查；

      無法做出工作曲線的檢查；

      允許收斂吸光度檢查；

      反應界限吸光度檢查；

      反應線性檢查；

      前帶檢查分為抗原再添加法和反應速度檢查；

      定標也就是校準，是確保儀器精度的一種手段，在定標之前一定要確保重復性，良好的重復性才是定標的前提。標準品是定值的，根據賦予的靶值來修正儀器的測量值，使其達到準確。