1、72型分光光度:72型分光光度計是可見光分光光度計,其波長范圍為420—720毫微米。
(1)操作方法:
① 按照接線要求,將穩壓器和檢流計連接在單色器上。注意,將檢流計與單色器相接時,應按三股接線的顏色準確連接。而穩壓器的輸出接線柱與單色器相接。
② 在電源電壓與儀器要求的電壓相符時,分別插上穩壓器和檢流計的電源插頭。
③ 將單色器的光路閘門找到黑點(關閉光路的指示)位置后,再將檢流計上的電源開關旋到“開”處。此時,指示光點即出現在標尺上,用零點調節器將光點中線準確地調至透光率標尺的。“0”位上。
④ 打開穩壓器的電源開關和單色器的光源開關,隔10分鐘,再使用儀器。
⑤ 將比色杯架暗廂蓋打開,取出比色杯架,將4支比色杯中的1支裝入空白溶液或蒸餾水,其余3支裝入待測液。將比色杯置于架上,空白溶液杯應放在第一格內,放回暗廂內,蓋好暗廂蓋。此時,空白溶液杯應在光路上。
⑥ 旋轉波長調節器,將所需波長對準紅線。把光路閘門撥到紅點(打開光路的指示)位置上,并以順時針方向旋動光點調節器,使光點中線移至透光率“100”的刻度處。數分鐘后,待光電池趨于穩定,再輕輕轉動光點調節器,使光點中線準確地處于透光率“100”的位置。
⑦ 將單色器的光路閘門撥回黑點處,校正檢流計的光點中線于“0”位上。然后,立即開啟光路閘門,撥至紅點處,校正檢流計光點中線對準透光率“100”刻度上。
⑧ 調節好后,可以進行樣品溶液的測定。將比色杯定位裝置的拉桿輕輕地拉出一格,使第二個比色杯內的待測液進人光路。此時,檢流計標尺上光點中心線所指示的讀教,即為該溶液的光密度或透光率。依此測定第二、第三個待測液,并讀出數據。重復2—3次后,取其平均值。
⑨ 在測定過程中,應經常關閉光路閘門,核對檢流計的零點位置。如有改變,及時用零點調節器核準。
⑩ 測定完畢,將每個旋鈕、開關和調節器等復原或關閉。拔掉電源插頭,切斷電源,并蓋好儀器罩。
(2)注意事項:
① 儀器連續使用時間不應超過2小時,每次使用后需要間歇半小時以上才能再用。
② 測定某未知待測液時,先制作該溶液的吸收光譜曲線,再選擇最大吸收峰的波長作為測定的波長。每次讀教后將空白杯推入光路,檢流計光點中線仍位于透光率 “100”,則讀數有效。
③ 其他注意事項與光電比色計相同。
2、751型分光光度計:751型分光光度計是可見光和紫外光分光光度計,其波長范圍為200—1000毫微米。
(1)操作方法:
① 在電源電壓與儀器要求的電壓相符時,插上電源插頭。
② 儀器裝有兩個光源燈。鎢燈的波長范圍為320—1000毫微米,氫燈為320毫微米以下。撥動光源燈座的把手,將選用的光源燈置于光路中。根據需要可以在光路中插入濾光片,以減少雜散光,一般情況下無此必要。
③ 檢查儀器各種開關和旋鈕,處于關閉位置時,打開電源開關,預熱20分鐘。
④ 選擇適當的比色杯,測定波長在350毫微米以上時,用玻璃比色杯;若在350毫微米以下,必須使用石英比色杯。比色杯盛入溶液后,放在比色杯架上,然后再放人暗廂內,蓋好蓋板。此時,空白溶液或蒸餾水的比色杯恰好處于光路中。
⑤ 選擇適當的光電管。測定的波長范圍在200—626毫微米內,用藍敏光電管,應將手柄推入:若在625—1000毫微米范圍以內,用紅敏光電管,應將手柄拉出。
⑥ 將選擇開關扳至“校正”位置后,轉動選擇波長的旋鈕,使波長刻度對準所需要的波長。
⑦ 調節暗電流旋鈕,使電表指針對準“0”位置。為了得到較高的準確度.每測量一次都應校正暗電流一次。
⑧ 調節靈敏度旋鈕,在正常情況下,從關閉的位置起沿順時針方向轉動3—5圈。
⑨ 轉動讀數電位器旋鈕,使刻度盤處于透光率100%位置。然后,把選擇開關扳至“ ×1”位置。再拉開暗電流閘門,使單色光進人光電管。
⑩ 調節狹縫旋鈕,使電表指針處于“0”位置附近,再用靈敏度旋鈕仔細調節,使電表指針準確地位于“0”’處。
⑾
完成上述操作后將比色杯定位裝置的手柄輕輕地拉出一格,使第二個比色杯的待測液處于光路中。注意,應使滑動板準確地位于定位槽內。這時電表指針偏離“0”
位。再轉動讀數電位器旋鈕,重新使電表指針對準“0”位,刻度盤上的讀數即為該待測液的光密度或透光率。依此測定第二、第三個待測液,并讀出數據。
⑿ 完成一次測量后,立即關上暗電流閘門,以保護光電管。
⒀ 在讀數時,若選擇開關處于“×1”位置,光密度(即消光)范圍為0—∞,透光率是O-100%。當透光率小于10%時,則可把選擇開關扳至“× 0.1”位置。這時,讀出的透光率數值,應除以“10”;而讀出的光密度值,則應加上“1.0”。
⒁ 測定完畢,將每個開關、旋鈕、操作手柄等復原或關閉。拔掉電源插頭,以切斷電源,并蓋好儀器罩。
(2)注意事項;
① 該儀器為貴重的精密儀器,應由專人負責管理和維護。
② 若外電路電壓波動較大,可使用穩壓器,以增加儀器的穩定性。
③ 其它注意事項與72型分光光度計相同