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  • 發布時間:2020-04-06 17:32 原文鏈接: 生物學實驗室常規設備介紹

    生物學實驗室常規設備介紹:

    1、超凈工作臺/生物安全柜

    細胞培養需要無菌要求高的環境,在進行操作細胞的實驗時,需要在100級的空氣下進行,那我們就需要購買能提供百級潔凈度的超凈工作臺或生物安全柜了。

    2、二氧化碳培養箱

    細胞培養所用的緩沖體系是碳酸氫鈉+HEPES體系,所以需要二氧化碳提供緩沖能力維持pH。這時我們就需要一個二氧化碳培養箱來對細胞進行培養。并且由于二氧化碳培養箱通常不具有制冷壓縮機,所以需要用戶確定其細胞房內在夏天也有全天候的空調制冷,否則會造成箱內溫度超標。

    3、倒置顯微鏡

    需要倒置顯微鏡的幫助。對于一些熒光免疫細胞實驗(IF),則還需要購買倒置的熒光顯微鏡。

    4、純水機/超純水機

    細胞培養還需要超純水系統,普通的純水和蒸餾水是無法用于細胞培養的,而超純水主要用于配置一些培養基和試劑,超純水的進水可為自來水或二級純水(質量好些的去離子水,電阻10兆歐左右)。

    5、移液槍,電動移液槍

    細胞實驗操作時,需要使用各種吸頭及移液管,所以配置移液槍是必要的。

    6、離心機

    細胞培養需要離心收集傳代細胞,一般轉速在1000轉到1500轉之間,所以需要購買低轉速的常溫離心機,而且要帶10ml,50ml及培養板的轉子。另外還需要一臺高速冷凍離心機用于收集細胞沉淀或細胞上清。

    7、低溫冰箱

    細胞在凍存時需要存放-70到-80度過夜再放入液氮罐,這樣則需要一個低溫冰箱。

    8、傳遞窗

    細胞房在構建時要與外界隔絕,這樣就需要購買傳遞窗來傳遞物品,減少污染的幾率,并且將所有進入細胞室的物品都在傳遞窗內進行紫外殺菌,可以保證潔凈室的安全。

    9、高壓滅菌鍋

    各類細胞實驗室器皿在使用前后都需要做滅菌處理,滅菌條件一般為121℃,20~30分鐘,這樣就需要一臺放置在潔凈室外的高壓滅菌鍋來保障生物安全性。

    10、細胞培養中需要的各種耗材

    各類細胞培養板,細胞培養瓶,平皿移液管等。

    11、其余儀器

    對于細胞實驗還可能需要振蕩器及磁力攪拌器用于混勻液體;還有一些沾滿細胞的難清洗的不銹鋼類或玻璃類器皿,則需要超聲波清洗機的幫助;如果涉及免疫實驗,肯定需要冰浴,碎冰的需求量大的話,則需要購買制冰機;另外破碎細胞可能會需要超聲波細胞破碎儀;最后需提及的是如果細胞房較大,則要配備手推車。

    12、液氮罐

    建立一個細胞庫,液氮罐就是必須的,放入液氮罐內的凍存細胞一般可以保證在近十年的時間內都具有生物活性,至于需要多大的液氮罐要根據細胞庫的大小而定。

    接下來我們重點介紹一下離心機:

    離心機:離心是研究如細胞核、線粒體、高爾基體、溶酶體和微體,以及各種大分子基本手段。離心技術是研究生物的結構和功能中不可缺少的一種物理技術手段。因為各種物質在沉淀系數、浮力、和質量等方面有差異,可利用強大的離心力場,使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離心機。離心技術應用廣泛,包括收集和分離細胞、細胞器和生物大分子等。

    據其轉速的不同,可分為以下幾種類型:

    1. 普通低速離心機:最大轉速小于10000 r/min;

    ①醫用或臺式離心機:是離心機中最簡單而廉價的,最常用于收集快速沉降系數的物質,如紅細胞、粗大的沉淀物、酵母菌和細菌等。

    ②低速冷凍離心機:主要用于細胞、細胞核、細胞膜和細菌的沉淀和收集等。

    2. 高速離心機:最大轉速10000-30000 r/min之間;

    有冷凍離心機和常溫離心機兩種,多用于制備和手收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。

    3. 超速離心機:最大轉速30000 r/min。

    哪些微生物實驗要用到離心機?

    質粒提取,蛋白表達,菌體清洗及收集,原生質體制備,微生物發酵前菌株的清洗,菌液洗滌,提取基因組或RNA提取 、DNA提取、酶活測定、濃縮菌體,提質粒,休止細胞反應等。總之,一切需要從液體中收集菌體的操作都需要用到離心機,所以實驗室離心機最常用的儀器設備。

    離心微生物細胞需要多大的離心力RCF

    比如:一般只是集菌的話5000rpm-6000rpm,5分鐘就夠了,10000rpm離心2min種即可收集到細菌菌體。

    離心機轉速與相對離心力的換算公式為:RCF=11.18×(RPM/1000)2×R rpm。


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