生物素姊妹篇鏈霉親和素及其衍生物的應用（二）

        HeLa細胞中α-微管蛋白的免疫熒光染色：將固定和透化的HeLa細胞中的α-tubulin與兔抗tubulin一抗一起孵育，然后與生物素化的山羊抗兔IgG（H＆L）（Cat# 16794）進行孵育，然后加入iFluor?647-鏈霉親和素偶聯物（Cat# 16966），使用DAPI（Cat# 17507）對細胞核進行復染。

       ①. 用于成像和流式細胞術的iFluor-鏈霉親和素綴合物：

       ②. mFluor?鏈霉親和素偶聯物用于流式細胞術：

       用mFluor?染料標記的鏈霉親和素偶聯物具有最小的自發淬滅，可為流式細胞儀產生強烈的熒光和穩定偶聯物。mFluor?鏈霉親和素偶聯物設計用于通過流式細胞儀中常用的主要激光線之一（例如405 nm，488 nm，532 nm，561 nm或633 nm激發光）進行最佳激發。

       用（紅色）或不用（綠色）1ug / ml生物素標記的抗人HLA-ABC的HL-60細胞的流式細胞分析，然后添加mFluor?Blue 570-鏈霉親和素偶聯物（Cat# 16935）。

       用于流式細胞術的mFluor?鏈霉親和素綴合物：

       ③. 鏈霉親和素APC，PE，PerCP組成串聯染料偶聯物用于流式細胞術：

       鏈霉親和素PE，APC和PerCP偶聯物通常用于需要高靈敏度但不需要光穩定性的應用中，主要是流式細胞，FACS，免疫表型和微陣列。藻膽蛋白異常明亮的熒光是由于它們異常高的消光系數和量子產率。

       串聯染料偶聯物是將供體藻膽蛋白（例如APC或PE）標記到受體iFluor?染料上，后者在較長波長下發出熒光。使用熒光共振能量轉移（FRET），供體藻膽蛋白吸收的光導致受體的熒光發射。在流式細胞儀中，串聯染料非常適合用于細胞的多色參數分析，這是因為它們利用的是單個激發光源并且其斯托克斯位移（Stokes shifts）非常大。

       用于流式細胞的鏈霉親和素APC，PE，PerCP和串聯染料偶聯物：

       ④. 鏈霉親和素-Xtra?綴合物：

       鏈霉親和素-Xtra?iFluor?偶聯物可用于細胞成像，流式細胞(FC)和蛋白質印跡(WB)等應用中生物素化抗體的檢測，從而產生最亮的熒光。與傳統的AlexaFluor?鏈霉親和素綴合物相比，Xtra?iFluor?鏈霉親和素綴合物可對低豐度目標蛋白進行成像，具有更高的靈敏度和細節。

       鏈霉親和素-Xtra?綴合物優點：

       明亮且穩定的熒光，無明顯的自發淬滅

       較高的信噪比：與AlexaFluor?相比，信號改善了3-5倍

       在較寬的摩爾范圍熒光內不受pH影響

用鏈霉親和素-Xtra?IF488和鏈霉親和素-AlexaFluor?488染色的HeLa細胞的比較

       鏈霉親和素-Xtra?綴合物：